高效溶栓菌株的筛选鉴定及活性测定-西南大学学报.pdfVIP

( ) 第 卷第 期 西 南 大 学 学报 自然科学版 年 月 33 6 2011 6 ( ) Vol.33 No.6 JournalofSouthwestUniversit NaturalScienceEdition Jun. 2011 y 文章编号: ( ) 1673 9868201106 0085 09 高效溶栓菌株的筛选鉴定及活性测定① 霍金柱, 陈 斌, 李 莹, 何正波, 敬俊锋 , ; , ; 1.重庆师范大学 昆虫与分子生物学研究所 重庆 400047 2.重庆高校生物活性物质工程研究中心 重庆 400047 , 3.活性物质生物技术教育部工程研究中心 重庆 400047 : 、 、 , 、 , 摘要 以日本纳豆 重庆江津豆豉 忠县豆腐乳为原料 采用酪蛋白平板初筛 摇瓶复筛 得到 株产溶栓酶的菌 18 , ( : ), 株 通过纤维蛋白平板实验 从忠县豆腐乳中筛选出 株具有较高溶栓活性的菌株 登录号 . 1 FR-033 HQ009804 , , 菌株经液体发酵后获得含酶发酵液 采用硫酸铵分段盐析及 sehadexG-50凝胶层析进行纯化 获得较高纯度的溶 p , / 栓酶 酶活力为 进一步对 菌株的形态和生理生化特征进行研究 利用细菌 通用 2163IU mL. FR-033 . 16SrDNA , , 引物对 16SrRNA进行 PCR扩增并测序 得到 1444bp长度的DNA序列 通过 BLAST软件在 NCBI网站收索其 , , : ( 同源性性序列 利用 和 软件绘制系统发育树 结果表明 菌株 与枯草芽孢杆菌 PAUP4.0 MAGE4 FR-033 Bacil- ) , , , 的 序列同源性达 以上 在系统发育树中 菌株 与枯草芽孢杆菌在同一支上 且 luss