噻虫嗪单克隆抗体制备及酶联免疫吸附分析方法的建立-分析化学.pdfVIP

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2017-11-25 发布于天津
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噻虫嗪单克隆抗体制备及酶联免疫吸附分析方法的建立-分析化学.pdf

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噻虫嗪单克隆抗体制备及酶联免疫吸附分析方法的建立-分析化学

( ) 第 40 卷分析化学 FENXI HUAXUE 研究报告第 7 期 2012 年 7 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 1098~1103 : / DOI 10.3724SP.J.1096.2012.11245 噻虫嗪单克隆抗体制备及酶联免疫吸附分析方法的建立李广领王自良李金丽肖娜娜赵亚娟陈锡岭* ( , ) 河南科技学院新乡 453003 , ( ) 摘要通过化学修饰合成了噻虫嗪人工半抗原采用碳二亚胺法将该半抗原与牛血清蛋白 BSA 和卵清蛋 ( ) , 。、白 OVA 偶联成功制备了分子结合比合理的免疫原和包被原经过免疫原免疫 6 周龄 Balb/c 小鼠 PEG 介 5 , 导免疫鼠脾细胞和骨髓瘤细胞的融合和阳性杂交瘤细胞的筛选和克隆化获得了效价高达 1 6.4 10 的抗噻 ∶ × , 。 , 虫嗪单克隆抗体抗体亚类为IgG1 型优化了ELISA 实验条件建立了基于单克隆抗体技术的噻虫嗪残留间。 ( ) , ( ) , ( ) 接竞争 ELISA 方法本方法的抑制中浓度 IC50 为0.0255 mg/L 检测灵敏度 IC20 为 0.0022 mg/L 检出限 IC10 。 , 。为0.001 mg/L 除噻虫胺外该抗体与其它噻虫嗪结构类似物无交叉反应以自来水为基质的噻虫嗪添加回 , , 收实验显示 0.01, 0.5 和 10.0 mg/L 添加水平的回收率均大于 75% 且各添加水平重复测定 8 次的相对标准偏 , , , 。差均小于 8% 说明所建立的间接竞争 ELISA 准确度高重复性好适合水中噻虫嗪残留的检测 ; ;