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【精选】11级植物生理实验讲解内容
植物生理实验讲解内容
实验一 植物组织水势的测定(小液流法)
1、原理
(1)水分移动的总原则:从高水势到低水势。当把植物组织分别放在一系列浓度递增的溶液中,水势越大,越易失水;水势越小,越易得水;因此,会出现三种情况:
植物组织的水势<外液的水势,组织吸水,外液(a)浓度变大
植物组织的水势>外液的水势,组织失水,外液(b)浓度变小
植物组织的水势=外液的水势,组织既吸水又失水,外液(c)水分保持动态平衡
(2)据比重大小判断小液流的移动方向:为判断以上三种情况,把侵有组织的溶液进行着色,当把着色的a、b、c三种外液用针管以小液流法放回对应的原溶液中,也出现三种情况:
当浓度变大的外液(a)放入原溶液中↓,说明植物组织的水势<外液的水势
当浓度变小的外液(b)放入原溶液中↑,说明植物组织的水势>外液的水势
当水分保持动态平衡的外液(c)放入原溶液中≈(不动),说明植物组织的水势=外液的水势
2、材料:毛果含笑叶;梧桐树叶;丁香花或牵牛花
4、方法(选用CaCl2溶液为外液)
思考题
试述小液流法测定植物组织水势的原理。测定中应注意什么?
遵照两个原理:①水分移动的总原则—从高水势到低水势。②根据比重大小判断小液流的移动方向。
测定中应注意:①取材时尽量避开叶脉和伤口、部位要一致、要迅速(以免失水),材料要混匀;②母液要均匀,不能颠倒顺序;③放小液流时不能用力过大;④观察液流方向要细心等]。
某组实验出现了小液流法↓ ↑ ↑ ↓ ↑ 的情况,请分析出现错误的可能原因。
最有可能出错的应是第四支试管。出错的原因有以下可能:(1)在配制甲组试管溶液时,试管没有充分的摇匀;(2)在配制甲组浓度梯度溶液时,第四支试管溶液不准确,浓度过低;(3)用注射器在甲组试管中挤出小液滴时,用力过猛。
3、测定水势的方法有:小液流法;电导仪法;折射仪法。
实验二 植物组织中游离氨基酸总量的测定——茚三酮显色法(
1.原理
氨基酸 (蛋白质)的游离-NH3可与水合茚三酮反应,生成蓝紫色的化合物;在一定范围内,颜色的深浅与游离氨基的含量成正比,因此,可用分光光度法测定其含量。
思考题
1、本方法除游离氨基酸外还有那些成分可被显色?据此评价本方法的实用意义。
蛋白质和多肽中也有游离氨基,所以也会被显色。据此评价本方法的实用意义为——此法只有除去蛋白质和多肽的前提下才能应用。
2、植物组织游离氨基酸测定为什么要除去蛋白质?方法2是如何除去蛋白质的?
因为蛋白质降解后也会产生游离氨基酸,所以要去除蛋白质。方法2是用沸水浴加热20分钟使蛋白质凝固而除去。
3、简述氨基酸测定的原理、方法和步骤。
原理:氨基酸 (蛋白质)的游离NH3(氨基)可与水合茚三酮反应,生成蓝紫色的化合物;在一定范围内,颜色的深浅与游离氨基的含量成正比,因此,可用分光光度法测定其含量。
方法和步骤:取数株小麦苗→称取0.5g左右→剪成碎段→放入大试管中→用移液管准确加入10ml蒸馏水→沸水浴加热提取20分钟——冷却→取1ml待测液放入20ml刻度试管中→加1ml茚三酮→用滤纸扎口→放入80℃水浴中加热15分钟——取出,用柠檬酸缓冲液稀释至10ml→用722分光光度计比色(610nm、1cm光径的比色皿)→读取C值→代入公式计算。
实验三 植物的溶液培养——缺素培养和生长测量
1.原理: 植物生长需要多种矿质元素(我们教材上是讲了17种,其中9种是大量元素,8种是微量元素),如果将植物必需的矿质元素按一定比例配成培养液,相当于平衡液,植物能正常生长发育。如认为的去掉某种必需元素,则表现出相应的缺素症状并影响其生长速率和根冠比,用这种方法来研究植物的矿质营养就是溶液培养。
2.材料:玉米幼苗
3.方法(先分组:8个人一组,每组8瓶,一人一瓶,一瓶栽一苗)
思考题
(1)为什么说无土培养法是研究植物矿质营养的重要方法。
应用无土培养技术可以观察矿质元素对植物生活的必需性,同时可以避免土壤里的各种复杂因素。
(2)根据缺素症状表现和生长结果,分析缺乏矿质元素对植物生长发育的影响。
可再利用的元素症状首先表现在老叶上,不能在利用的元素症状首先表现在新叶上;缺乏不同元素对植物的影响,从生长速率和根冠比都能反应出来。应该结合不同元素具体分析说明。
(3)缺素影响生长速率和根冠比,两者如何测定和计算?(相对生长速率和根冠比看P101)
相对生长速率计算:
式中 Q1 —为原有长度(cm)或重量(g)、 t1—开始时间
Q2—为实验结束时的长度(cm)或重量(g)、 t2—结束时间
根冠比计算
根据计算结果和缺素症表现,分析原因。
缺N:植株矮小,(),,,),,,,()(),,,,,,CO2被Ba(OH)2 吸收生
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