梅毒螺旋体实验室检验课件.ppt

暗视野梅毒螺旋体 梅毒螺旋体 荧光法检查梅毒螺旋体 注意事项： 实验环境温度应为：23-29 ℃ 抗原应保存于4 ℃冰箱，实验前应恢复到室温。 抗原应防止冻结。 血液标本实验前应恢复到室温，并在24小时内完成检测。 试验完毕应立即观察结果。 假阴性 有25%-40%的未治疗梅毒在晚期隐性期可自然逆转为阴性，约30%的心血管和神经梅毒呈阴性 前带现象：抗原抗体量比例不适，抑制阳性反应。一般易发生在滴度在1：500以上的标本中。 1%的II期梅毒会出现前带现象 操作人员应注意实验的温度，试剂盒从冰箱取出后应恢复至室温，室温过低（〈10℃）可能出现假阴性或结果不准确（即使出阳性结果，试验滴度也不准）。 生物学假阳性： 急性或慢性传染病：风疹、麻疹、水痘、疟疾、上呼吸道感染、病毒性肝炎，活动性肺结核、麻风，肺炎球菌性肺炎等； ②其它疾病：SLE、类风湿性关节炎、风心病、DLE、肝硬化、慢性肾炎、系统性硬化症、自身免疫性溶血性贫血等； ③身体状况改变：麻醉剂成瘾、妊娠、年老等 一般假阳性血清抗体滴度1：8 应排除技术性、生理性和生物学假阳性，并用特异性试验来证实 已知抗原：梅毒螺旋体抗原 检测成分：抗梅毒螺旋体抗体 方法： 1.荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS） 2.梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA） 3.梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA） 4.梅毒螺旋体ELISA试验 5.快速试验（胶体金） 原理： 用整菌和其片断做抗原致敏的明胶颗粒，此致敏颗粒与人血清或血浆中的梅毒螺旋体抗体结合，产生肉眼可见的凝集反应 敏感性和特异性均高 敏感性：一期梅毒：70%-100%， 二期梅毒：100% 三期梅毒95%-98% 特异性：94%-100% 容许做梅毒的精确诊断 原理示意图 明胶颗粒 抗原 材料 U型板 、微量加样器（25ul）、振荡器 TPPA试剂盒(溶解液，样本稀释液, 致敏颗粒, 非致敏颗粒,质控血清,专用滴管） 方法 结果判断 阴性(－):颗粒沉积在孔底,周边平滑,或形成致密圆圈 可疑反应(±):明胶颗粒沉积在孔底,中央形成致密小环, 周边平滑 阳性(+/++):内有清晰的宽环且外缘粗糙 强阳性(+++/ ++++):孔内凝聚颗粒形成均一的膜覆盖在整 个孔底者 孔内样品与致敏和非致敏颗粒均产生凝集者,则需作重吸收试验后进一步检测 注意事项 ①专用滴管应标明不能混用，不能用来稀释血清。 ②未致敏孔不发生凝集，否则试验无效。如果标本与非致敏和致敏颗粒均产生凝集，需作重吸收试验。 ③反应板要清洁干净，孔内无异物。 ④试剂保存于2~10℃，不可冻结，不同批号试剂间不可混用 梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（ELISA） 快速检测试剂（胶体金） 非特异性血清学试验阳性可能表示： 现症感染、接受或未接受过治疗的近期感染 可用于疗效观察、判愈、判定复发及再感染 早期梅毒患者经充分治疗后，滴度逐渐下降，半年到2年大部分非特异性血清学试验阴转 可能有生物学假阳性(滴度常1:8） 适用于人群筛查、产前检查及健康体检 特异性血清学试验阳性结果表示 现症感染 接受或末接受过治疗的近期感染 既往曾经感染 特异性血清学试验因其敏感性高，特异性强，可作为证实试验及排除假阳性。特别是隐性梅毒及一些非梅毒螺旋体抗原血清试验阴性而又怀疑为梅毒的患者。 在多数情况下，一旦感染了梅毒，特异性血清学试验抗体阳性可保持数年，甚至终生阳性，故定性的特异性血清学试验不能用于观察疗效、判断复发及再感染。 人是梅毒螺旋体的唯一自然宿主 梅毒螺旋体不能在体外培养繁殖 最适生存温度是37℃，离开人体很快死亡 ● 梅毒螺旋体属厌氧微生物，耐寒能力强。煮沸、干燥、肥皂水及一般消毒剂均可短期内将其杀死 致病物质：荚膜样物质、粘多糖酶 所致疾病——梅毒 后天梅毒－－经性接触传染 临床分期 一期梅毒：外生殖器硬性下疳 二期梅毒：全身梅毒疹 三期梅毒：皮肤粘膜溃疡、侵犯内脏器官或组织 隐性梅毒：无任何梅毒性的症状和体征 先天梅毒－－经胎盘传给胎儿 胎儿表现为流产、死胎 出生后表现为锯齿形牙、鞍形鼻等 发病率位于前5位： 浙江：97.13/10万 广西：82.58/10万 上海：75.93/10万 福建：58.23/10万 新疆：52.97/10万 男女性别比：0.94︰1 15-39岁：女性多于男性 40岁以上：男性多于女性 标本采集部位： 皮肤或粘膜损害 有痂者去痂，先用无菌棉球或纱布蘸生理盐水，将皮损拭净，轻压皮损至渗液（避免出血