海洋生态学实验.doc

厦门大学 海 洋 生 态 学 实 验 讲 义 厦门大学海洋系海洋生态学教学组 编 一九九九年七月  实验一、温度对海洋动物发肓速率和孵化率的影响 实验目的： 测定不同温度下海洋动物的发肓速率和孵化率，总结某些特定动物发肓的生物学零度和热常数。 掌握控温仪、恒温水浴锅、光照培养箱等仪器的使用方法。 原理：参见《海洋生态学》第二章。 根据有效积温法则，生物胚胎发育所需总热量基本上是一个常数，即 K = N（T－C），其中K为热常数，即完成某一发育阶段所需的总热量，N为完成某一发育阶段所需的时间，T为发育期的平均温度，C为生物学零度。因此，在适温范围内，提高温度可缩小胚胎发育时间。 三、仪器与设备： 光照培养箱 2、控温仪或恒温水浴锅 3、充气机 4、1000ml烧杯等玻璃仪器 实验材料 ： 卤虫（Artemia spp.）又名丰年虫、丰年虾等，广泛分布于世界各大陆的盐湖、盐田等高盐水域，其适宜盐度范围为20~100，适宜温度范围为25℃~30℃。卤虫休眠卵（自天然水域捞取后经分离、干燥后制成商品）孵化的无节幼体是水产动物培养初期的优良饵料，其成体亦可作为水产动物的饵料。正常卤虫休眠卵在适宜条件下，一般15小时左右开始孵化，24小时孵化率达90%以上。 实验步骤 在12只盛有天然过滤海水的1000ml烧杯中加入一定数量（如500粒）卤虫休眠卵，以小型充气机适量充气，使休眠卵均匀悬浮在海水中，并供以连续关照，强度约1000Lx。将烧杯分为4组，分别在15℃、20℃、25℃和30℃（以光照培养箱、控温仪或恒温水浴锅控制水温）温度下孵化。 孵化15小时后，每隔1小时对幼体孵化状况进行观察，并在18、21、24小时分别从4个温度组中取1样品固定计数，计算孵化率。 温 度 （℃） 最早孵化时间 （小时） 18小时孵化率 （%） 21小时孵化率 （%） 24小时孵化率 （%） 15 20 25 30 以孵化率达90%时的孵化时间作为卤虫胚胎发育的所需时间，根据有效积温法则，计算卤虫发育的生物学零度和热常数。  实验二、温度对海洋动物呼吸速率的影响 实验目的： 测定海洋动物在适温范围内呼吸速率，分析与温度的相互关系。 学会温克碘量法测定海水溶解氧含量。 原理： 海洋动物的新陈代谢速率直接受温度的影响，在适宜温度范围内，当温度升高时，新陈代谢速率随之加快，呼吸率（耗氧率）也相应增加。温度与生物代谢速率的关系可用公式Q10=[r2/r1] 描述。式中Q10表示温度每升高10℃时代谢速率的变化，r1和r2分别表示温度在t1和t2 时的耗氧率。 仪器及设备： 自动滴定管 2、 磁力加热搅拌器 3、控温仪或恒温水浴锅 4、恒温培养箱 5、容量瓶等玻璃仪器 四、药品与试剂： MnCl2 、KI、 NaOH、H2SO4、Na2S2O3、KIO3、淀粉等 五、实验材料： 花蛤、对虾等。 实验步骤： 本实验拟在2个温度组下进行，每一温度组又分试验组和空白对照组，共4组，每组含样品3个，分别为起始、培育1小时和培养2小时（见下表），简要步骤如下： 1、取容量1L试剂瓶12只，用取自实验动物栖息水域的过滤海水（预先充气使含氧量接近饱和）注满，在2个试验组水瓶中小心放入个体大小相近、健康状况良好的对虾1~2只（起始样除外），用橡皮塞小心密封（注意不能出现水泡）。分不同温度组在光照培育箱和恒温水浴锅中恒温培养，并给以适宜关照。 每组分别在起始、1小时和2小时时以温克碘量法（方法参照《海洋调查规范》）测定水瓶中溶解氧的含量，填入下表。测量完成后将瓶中对虾取出，蒸馏水冲洗后用滤纸吸干体表水分称重。 时间 数 值 温 度 起 始 1 小 时 2 小 时 20℃试验组 20℃对照组 30℃试验组 30℃对照组 数据计算：各温度组实验前后的溶解氧之差扣除空白对照组氧消耗量后所得值即为该段时间内实验动物的耗氧量，各瓶的耗氧量与瓶中实验动物体重之商则为单位体重耗氧率。将所得数据代入上述公式，计算Q10。 思考题：试分析实验中可能出现的影响因素。 实验三、浮游植物的培养与种群数量增长曲线 实验目的： 了解海洋浮游植物的培养方法，并根据细胞数量增长速率绘制增长曲线（逻辑斯谛增长曲线）。 二、 原理：见《海洋生态学》第三章第三节。 三、 仪器与设备： １、显微镜 ２、浮游植物计数框或血球计数板 ３、三角烧瓶 ４、手提式压力蒸汽消毒器 四、 药品与试剂： NH4NO3 、KH2PO4 、尿素 、维生素Ｂ12等 实验材料： 实验室常用培