消毒质量现场采样及检测方法-谈智.ppt

消毒质量现场采样及检测方法 谈智 采样及检测原则 采样时间：消毒处理后，医疗活动前期间 采样后尽快检测，送检时间≤6小时，若样品保存0—4℃，送检时间≤24h 一、空气 器材：9cm普通营养琼脂平板 方法：平板暴露法（沉降法） 一般情况：按GB 15982-1995 医院消毒卫生标准： 布点方法：室内面积≤30m2,设内、中、外对角线三点，内外布点距墙壁1m；室内面积＞30m2，设中央及四角5点，四点的布点位置距墙1m， 暴露时间5min 培养时间：48小时 计算公式：细菌总数（cfu/m3）=50000N/(A×T) A：平板面积（cm2） T：平板暴露时间 N：平均菌落数 检出限：对于≤30m2房间，如果3块平板共长1个菌，则根据公式，计算结果为52.3 报＜53cfu/ m3 对于＞30m2房间 计算结果为31.4， 报＜32cfu/ m3 对于洁净度要求高的环境，该方法的最低检出限与评价标准不一致 GB 15928-1995规定 Ⅰ类环境≤10 cfu/ m3 洁净手术室：依据GB 50333-2002检测 二、物体表面 1、采样液 对于只清洁、未消毒的表面：无菌生理盐水 消毒后的物体表面：根据使用消毒剂选择含相应中和剂的采用液 2．采样方法 5cm×5cm标准规格板 棉拭采样≥100cm2； 门把手等不规则物体表面：直接涂抹 3、中和剂的选择 4、检测 细菌总数：取1ml接种平皿 金黄色葡萄菌：1ml接种5mlSCDLP液体培养基，36±1℃培养24h，血平板分离 乙型溶血性链球菌：样品1ml接种1%葡萄糖肉汤 沙门氏菌：按照GB4789.4 1ml加入增菌液中 四、工作人员手 1．采样液： 无菌生理盐水 适合只清洁，未用消毒剂的情况 含相应中和剂的采样液 适用于消毒后采样 2．采样方法 被检人员五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子，在双手指屈面从指根到指端往返涂擦2次（一只手涂擦面积约30cm2）并随之转动采样棉拭，剪去操作者手接触部位，将棉拭投入采样液 五．使用中消毒液 1．采样时间：更换前，使用中的消毒液 2．需要检测微生物污染情况的： 采样液：含相应中和剂的营养肉汤， 采样方法：取1.0ml消毒液加入9.0ml含中和剂的营养肉汤 3．需要测定含量：另取干净、干燥的采样瓶直接取样 采样量＞100ml 要求采样量满足检测需要。 六、内窥镜 采样依据：内镜清洗消毒技术规范 方法 检测部位：内镜的内腔面 用无菌注射器抽取10ml含相应中和剂的缓冲液，从待检内镜活检口注入，用15ml无菌试管从活检出口收集，及时送检，2小时内检测 检测： 菌落计数：充分振荡，取0.5ml接种2个平皿后倾注营养琼脂，35℃培养48h后计数 致病菌： 0.2ml接种血平板 0.2ml接种中国兰平板 0.2ml接种SS平板涂布 35℃培养48h 观察有无致病菌生长 七．污水 1、检测依据：GB 18466-2005 医疗机构水污染排放标准 2、检测项目 余氯的检测：现场用干净空瓶采样，直接用余氯测试盒检测余氯 粪大肠菌群沙门氏菌志贺氏菌的检测： 采样：污水采样加入含1g硫代硫酸钠的灭菌瓶中，根据GB18466-2005检测 八．灭菌器 1、压力蒸汽灭菌器灭菌效果：嗜热脂肪杆菌芽孢 培养温度：56±1℃ a.检测方法：下排气式压力蒸汽灭菌器、预真空和脉动真空灭菌器，生物指示剂置于标准包中心部位，标准包置于排气口上方。 b.手提压力蒸汽灭菌器 用通气储物盒代替标准包，盒内盛满中试管，生物指示剂放于中心部位放于中心部位两只灭菌试管内，储物盒平放于手提压力蒸汽灭菌器底部 2、环氧乙烷灭菌器灭菌：枯草杆菌黑色变种芽孢生物指示管 均匀分布灭菌物品中。 36±1℃培养 3、干热灭菌器：枯草杆菌黑色变种芽孢 九．紫外线辐照强度 1．器材：紫外辐照计 2．检测方法：开灯5min后，探头放在灯管中心距高1m处检测 3．注意事项： 仪器定期检定，在检定期内使用 每次使用时需要仪器调零 个人防护：眼罩、口罩、帽子、防止紫外线灼伤。 谢谢 * * 平板沉降方法： 沉降时间30min 布点要求及沉降菌标准 ≤4 ≥2点 十万级 周边区 ≤2 ≥2点 万级 手术区 一般洁净手术室 ≤1.5 ≥2点 万级 周边区 ≤0.75 ≥5点 千级 手术区 标准洁净手术室 ≤0.4 ≥5点 千级 周边区 ≤0.2 ≥13点 百级 手术区 特别洁净手术室 标准（cfu/皿） 布点数 洁净度 等级 区域 1%甘氨酸、0.5%吐温80 2%戊二醛 0.5%卵磷脂、0.5%