苹果PGIP基因部分家族成员启动子的克隆与功能分析.pdf

园 艺 学 报 2014 ，41（11）：2169 –2 178 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com 苹果PGIP基因部分家族成员启动子的克隆与 功能分析 符聪慧，王建平，张 冲，马锋旺，张军科* （西北农林科技大学园艺学院，陕西杨凌 712100 ） 摘 要：根据已发表的苹果基因组序列设计特异引物，克隆了苹果（Malus × domestica Borkh. ）品种 ‘秦冠’和‘太平洋玫瑰’中PGIP 家族基因 PGIP1 和 PGIP2 的启动子片段，序列分析结果表明PGIP1 与 PGIP2 启动子序列相似度为 71%，‘秦冠’和‘太平洋玫瑰’的PGIP1 、PGIP2 启动子相似度都达到了 99% 。两个品种PGIP1 启动子中 TATA-box 和 CAAT-box 的数量明显多于PGIP2 ，PGIP1 和 PGIP2 启动 子分别存在茉莉酸甲酯和水杨酸响应元件，暗示 PGIP1 和 PGIP2 存在不同的抗病响应途径。构建了启动 子 ︰︰GUS 融合表达载体，通过对农杆菌介导法转化烟草叶片中的 GUS 活性分析，比较了不同启动子的活 性。结果表明：PGIP1 启动子活性在品种间差异不显著；PGIP2 启动子活性在品种间差异显著，‘秦冠’ 是 ‘太平洋玫瑰’的2.37 倍，可能与品种抗病性差异有关；同一品种中 PGIP1 启动子活性显著高于 PGIP2 。 关键词：苹果；PGIP 基因；启动子；顺式作用元件 中图分类号：S 661.1 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2014 ）11-2169-10 Cloning and Function Analysis of Part of PGIP Gene Family Member Promoters from Apple * FU Cong-hui ，WANG Jian-ping ，ZHANG Chong ，MA Feng-wang ，and ZHANG Jun-ke （College of Horticulture，Northwest A F University ，Yangling，Shaanxi 712100，China） Abstract ：Primers were designed according to the published sequence of the apple genome and two PGIP gene promoters of Malus× domestica Borkh. ‘Qinguan ’and ‘Pacific Rose ’were cloned. PGIP1 were 71% homology with PGIP2 gene promoters in both apple cultivar ；Both PGIP1 and PGIP2 gene promoters of ‘Qinguan ’and ‘Pacific Rose ’shared a sequence identity of 99%. PGIP1 promoters had more TATA-box and CAAT-box than that of PGIP2 promoters ，and PGIP1 gene promoters contained methyl jasmonate-responsive elements ，while PGIP2 gene promoters owed salicylic acid responsive elements. It’s speculated that there are different disease response pathways of PGIP1 and PGIP2