第四章中药制剂的含量分析课件.ppt

止咳灵注射液中总生物碱的含量测定 精密量取本品10mL,置分液漏斗中，加1mol/LNaOH溶液0.5ml，用三氯甲烷提取4次（10ml、 10ml、 5ml、 5ml，合并三氯甲烷溶液，置具塞锥形瓶中，精密加入硫酸滴定液（0.01mol/L)10ml及新沸过的冷水10ml，充分振摇，加茜素磺酸钠指示液1～2滴，用NaOH滴定液（0.02mol/L)滴定至淡红色，并将滴定结果用空白试验校正，每1ml硫酸滴定液（0.01mol/L）相当于3.305mg的麻黄碱（C10H15NO)。 本品每1ml含总生物碱以麻黄碱（C10H15NO)计，应为0.50～0.80mg。 测定法 取本品20片，除去包衣，精密称定0.2100g，研成细粉，精密称取0.5315g（约相当于5片的重量），精密加入稀乙醇25ml，密塞，摇匀，超声处理5分钟，静置3小时以上，滤过，精密量取滤液4ml，置50ml量瓶中，用水稀释到刻度，摇匀，再精密量取2ml，置25ml量瓶中，照标准曲线置备项下的方法，自“加水至6ml”起，依法测定吸收度，A = 0.362，并取同样量的供试品溶液，加水至25ml作空白。从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的重量，计算每片总黄酮含量（以无水芦丁计）。《中国药典》规定本品每片含黄酮以无水芦丁（C27H30O16）计，不得少于25.0mg。 ①标准曲线的制备？ ②计算供试溶液浓度？ ③计算每片总黄酮含量？ 0.627 0.510 0.406 0.305 0.202 0.102 A 0.048 0.040 0.032 0.024 0.016 0.008 C（mg/ml） 6 5 4 3 2 1 份号 . . . A A＝－0.00045＋10.8696C (r＝0.9998) C ＝ 0.092A ＋0.0000413 C（mg/ml） ＝0.092×0.3620＋0.0000413＝0.03335 C×25ml×50ml×25ml×0.105g/片 2ml×4ml×0.5315g 含量(mg/片) = = 25.7 计算分光光度法 （有多组分存在时） 等吸收双波长消去法，导数光谱法等 仪器与溶剂的要求 校正测定波长；杂散光检查；溶剂的检查 定义 薄层扫描法（TLCS）系指用一定波长的光照射在薄层板上，对薄层色谱中有紫外或可见吸收的斑点或经照射能激发产生荧光的斑点进行扫描，将扫描得到的图谱及积分值用于药品定性定量分析的方法。 特点 具有分离分析双重功能。与高效液相色谱法比较，具有多通道效应，可同时平行分离分析多个样品；流动相用量少且选择范围宽、更换方便；固定相为一次性使用，对样品的预处理要求不高等优点。目前随着制板、点样、展开等操作的仪器化及仪器性能的改进，该法检测的灵敏度，结果的精密度与准确度均大大提高，在中药及其制剂检验中，已成为重要的分析方法。《中国药典》中有32个中成药品种采用该法进行含测。 三、薄层扫描法 测定方式 （1）吸收法 适用于有紫外（可见）吸收的成分，较常用。该法又可采用反射法或透射法测定。理论上讲，透射法比反射法优越，但实际工作中常用反射法，因为紫外光不能通过玻板。 （2）荧光法 适用于有荧光性质的成分，例如小檗碱等。该法仅采用反射法测定，其灵敏度比吸收法高 方法学考察： 1、工作曲线：确定一点还是两点法定量 2、分离度： 应大于1.0 3、重复性：RSD应不大于3.0％，需显色的应不大于5.0％ 4、准确度：95％～105％之间，测量数据为5 ～6个 5、统计检验：F检验与t检验 含量测定方法（外标法） TLCS含量测定有外标法和内标法，中国药典仅采用外标法。 1.原理 外标法系将一定量的供试品溶液和对照品溶液分别点加在同一块薄层板上，展开，显色，定位，扫描被测成分和对照品斑点，测得相应的吸收度或荧光强度积分值，根据定量关系，计算出被测成分的含量。 2.类型 根据对照品标准曲线性质的不同，外标法又分为外标一点法和外标两点法。 若标准曲线通过原点，采用外标一点法。 若标准曲线不通过原点，采用外标两点法。  外标一点法的直线方程： C = F A F 为斜率 外标两点法的直线方程：  、 F1为斜率 F2为截距 3.操作步骤 （1）对照品溶液的制备 （2）供试品溶液的制备 （3）点样 在薄层板的起始线上，将定量的样品液点成一条状，点 样时应避免任何损失。在板的两边，点上对照品作为定位剂，然后，在选好的溶剂中层开，斑点要集中，不应有拖 尾现象。