重庆市动物疫病免疫抗体监测.doc

附件 重庆市动物疫病免疫抗体监测 技术规范（试行） 1范围 本规范规定了动物疫病免疫抗体监测的病种、采血（采血器材、采血时间、采血方法、采血数量、全血保存、血清分离与保存）、检测方法、检测结果记录与汇总、血清留样等技术。 本规范适用于重庆市行政区域内动物疫病免疫抗体的监测活动。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本规范的引用而成为本规范的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本规范。然而，鼓励根据本规范达成协议的各方研究可以使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注明日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本规范。 引用标准有： 中华人民共和国动物防疫法； NY/T 541-2002，动物疫病实验室检验采样方法； NY/SY 150-2000，口蹄疫诊断技术规程； GB/T 18935-2003，口蹄疫诊断技术； GB/T 18936-2003，高致病性禽流感诊断技术； NY/SY 156-2000，猪瘟诊断技术规程； GB 16550-1996，新城疫检疫技术规范。 3监测病种 动物免疫抗体监测重点是重大动物疫病（口蹄疫、高致病性禽流感、猪瘟、新城疫）。 4 采血 4.1 采血器材 采样所需器材：防护服、无粉乳胶手套、防护口罩、灭菌剪刀、镊子、手术刀、注射器、针头、记号笔、签字笔、空白标签纸、胶布、抗凝剂、75%酒精棉球、碘酒棉球、15mL的离心管、1.5mLEP管、冰袋、冷藏容器、消毒药品、血清采样单和调查表等。 4.2采血时间：免疫注射后21天的动物方可采血。 4.3 采血方法 对采血部位的皮肤先剃（拔）毛，碘酊消毒， 75%的酒精消毒，待干燥后采血。采血方法推行生猪站立式或仰卧式前腔静脉、牛羊站立式颈静脉、禽类翅静脉采血，采血过程严格无菌操作。 4.4 采血数量 单一病种抗体监测的每头（只）采集2～3mL全血，多病种抗体检测的每头（只）采集5～10mL全血。 4.5 全血保存 采集好的全血转入盛血试管，斜面存放，室温凝固后直接放在盛有冰块的保温箱，送实验室。从全血采出到血清分出的时间不超过10h。 4.6 血清分离与保存 4.6.1 分离血清 凝固全血在室温2～4h后，有血清析出时，用无菌针剥离血凝块，然后放入4℃冰箱4～8h后，待大量血清析出时，吸出血清。必要时经离心机3000rpm 、30min离心，吸出血清。 4.6.2 血清保存及运送 分离的血清，一般不加防腐剂。血清若在1～2周内即可检验，可放在4℃冰箱内保存；如果保存时间较长，应放在-20℃～-80℃冰箱内保存。运送血清时可将血清放在盛有冰块的保温箱中运送。 4.6.3血清编号及采样单填写 采血时应按《动物血清采样单》的内容详细填写采样单，动物血清采样单一式三份，一份由被采样单位保存，一份由送检单位保存，一份由检测单位保存。动物血清采样单详见附表1。 5抗体检测方法 常见动物疫病免疫抗体检测标准及方法详见附表2。 6检测结果记录与汇总 6.1 抗体效价记录 每份血清检测完毕，分滴度（效价）进行记录。抗体结果记录表详见附表3。 6.2 抗体检测结果汇总 以监测区县、乡镇、规模畜禽场、行政村为单位，分单位、时间、动物病种、动物种类、动物年（月）龄等分滴度进行汇总。抗体结果汇总表详见附表4。 7血清留样 血清监测完以后，需要对血清进行编号留存，填写血清留样记录表。血清留样记录表详见附表5。 8 附表 1、动物血清采样单； 2、常见动物疫病免疫抗体检测标准及方法； 3、抗体结果记录表； 4、抗体结果汇总表； 5、血清留样记录表。 表1 动物血清采样单 血清样品编号 动物种类 种（蛋）用 日龄 耳标号 免疫情况 健康状况 采样地点 抽样比例 市场样品来源地 备注 疫苗种类 生产厂家/批号 免疫剂量 免疫时间 （乡镇、村、养殖场、屠宰场、市场、畜主） 被采样单位: 采样时间 采样人（签字）： 采样单位: 表2 常见动物疫病免疫抗体检测标准及方法 分类 动物疫病种类 执行标准 检测方法 国家强制免疫的重大动物疫病 禽流感 GB/T 18936-2003 血凝-血凝抑制试验（HA-HI）和琼