果蝇的三点测交与遗传作图.ppt

实验六 果蝇的三点测交与遗传作图 湖州师范学院 生命科学学院生物系 一、实验目的： 1、掌握三点测交的原理及方法； 2、学习三点测交的数据统计处理及分析方法； 3、了解绘制遗传学图的原理和方法 二、实验材料： 五、实验步骤： 1、选处女蝇：每组做正，反交各1瓶，正交选野生型为 母本，三隐性雄蝇为父本。反交选三隐性雌蝇为母 本，野生型为父本，将母本旧瓶中的果蝇全部麻醉处 死，在8-12h内收集处女蝇5只，将处女蝇和5只雄蝇 转移到新的杂交瓶中，贴好标签，于25℃培养； 2、7d后，释放杂交亲本（一定要干净）； 3、再过4-5天，F1成蝇出现，在处死亲本7天后，集中观 察记录F1表型及性别。 4、选取5对F1代果蝇，转入一新培养瓶，于25℃培养， 其余F1代果蝇处死； 5、7d后，处死F1亲本； 6、再过5d，F2成蝇出现，开始观察记录，连续统计7d， 观察眼色，翅形及刚毛形态。正交只需统计雄性个体。 六、实验结果： 1、将观察到的F2代各表型个体数填入书本P17表5-1中，确定基因间重组发生的情况； 2、计算基因间的重组值及双交换值； 3、根据计算结果画出遗传学图。注意用双交换值对位于两端的基因间距离进行校正； 4、计算并发系数和干涉值； 5、思考：正交组合F2统计为什么只需统计雄性个体？其雌性个体F2代个体的表型如何？ * * 黑腹果蝇品系： 野生型果蝇（+++） 红眼、长翅、直刚毛 三隐性果蝇（wmsn3） 白眼、小翅、焦刚毛 三隐性个体为白眼（w）、小翅（m）、焦刚毛（sn3）， 这三个基因都位于X染色体上。 三、实验仪器设备： 体视显微镜、恒温培养箱、培养瓶、麻醉瓶、毛笔、滤纸、培养皿 位于同一条染色体上的基因是连锁的，而同源染色体上的基因之间会发生一定频率的交换，使子代中出现一定数量的重组型。 重组型出现的多少反映出基因间发生交换的频率的高低。 而根据基因在染色体上直线排列的原理，基因交换频率的高低与基因间的距离有一定的对应关系。 基因图距就是通过基因间重组值的测定而得到的。 如果基因座位相距很近，重组率与交换率的值相等，直接将重组值作为基因图距；如果基因间相距较远，两个基因间往往发生两次以上的交换，必须进行校正，来求出基因图距。 四、实验原理： 三点测交：用三杂合体和三隐性个体杂交，获得三因子杂种（F1），再使F1与三隐性基因纯合体测交，通过对测交后代表现型及其数目的分析，分别计算三个连锁基因之间的交换值，从而确定这三个基因在同一染色体上的顺序和距离。通过一次三点测验可以同时确定三个连锁基因的位置，即相当于进行三次两点测验，而且能在试验中检测到所发生的双交换。 如果两个基因间的单交换并不影响邻近两个基因的单交换，那么预期的双交换频率应当等于两个单交换频率的乘积，但实际上观察到的双交换值往往低于预期值，因为每一次发生单交换，它邻近也发生一次交换的机会就减少一半，这叫干涉。一般用并发率表示干涉的大小。 并发率＝ 观察到的双交换频率 两个单交换频率的乘积 P： × F1： × （测交） 雌蝇X染色体上三对基因之间发生交换重组， 雄蝇产生两种配子 产生8种雌配子 m sn3 w m sn3 w + + + m sn3 w + + + m sn3 w m sn3 w + + + m sn3 w + + + m sn3 w + + + m sn3 w m + + + sn3 w + + + m sn3 w m sn3 + + + w + + + m sn3 w m + w + sn3 + + +