1 200 ITUmg Bti浓悬浮剂的研制.docVIP

1 200 ITUmg Bti浓悬浮剂的研制 　　摘要：通过对苏云金芽孢杆菌以色列亚种Ｂｔｉ Ｌ－１０菌株进行培养基的改良优化得到一种理化性质好、利于后处理的配方。２００ Ｌ罐发酵效价达３９５ ＩＴＵ／μＬ；通过后处理工艺的优化，得到一种制备１ ２００ ＩＴＵ／ｍｇ Ｂｔｉ浓悬浮剂路线，即发酵液２次离心并高倍浓缩得到菌浆，添加各种助剂经砂磨机研磨，得到Ｂｔｉ浓悬浮剂产品效价达到１ ２４５ ＩＴＵ／ｍｇ。 　　关键词：苏云金芽孢杆菌以色列亚种；浓悬浮剂；制备工艺 　　中图分类号：Ｓ４８２．３＋９；ＴＱ４５３．５ 文献标识码： Ａ 文章编号：0439－８114（２０11）24－5113-03 　　 　　Development of 1 200 ITU/mg Bacillus thuringiensis subsp. israelensis Suspension Concentrate 　　 　　ＬＩＡＯ Ｘｉａｎ－ｑｉｎｇ，ＬＩＵ Ｆａｎｇ，ＺＨＯＵ Ｒｏｎｇ－ｈｕａ，ＺＨＡＮＧ Ｚｕｎ－ｘｉａ，ＹＡＮＧ Ｚｉ－ｗｅｎ 　　（Ｈｕｂｅｉ Ｂｉｏｐｅｓｔｉｃｉｄｅ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ／ Ｔｈｅ Ｂｒａｎｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｂｉｏｐｅｓｔｉｃｉｄｅ， Ｈｕｂｅｉ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ Ｃｅｎｔｅｒ，Ｗｕｈａｎ ４３００６４，Ｃｈｉｎａ） 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： The culture medium for highly toxic Bacillus thuringiensis subsp. israelensis L-10 strain was obtained by orthogonal tests of nitrogen source. The formula with good physicochemical properties was conducive to the post-treatment. In the pilot fermentation in 200 L fermentors, the potency of the fermentation broth was 395 ITU/μL. After the optimization of post-treatment, the optimal route of 1 200 ITU/mg Bti suspension concentrate was developed. It was prepared by using fermentation broth to the secondary centrifugation and high-powered concentration, then adding additive and grinding with sand mill. Its titer reached 1 245 ITU/mg against mosquito larva. 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ ｓｕｂｓｐ． ｉｓｒａｅｌｅｎｓｉｓ； suspension concentrate； optimal route 　　 　　蚊类作为主???卫生害虫之一，除叮刺、骚扰人类及动物外，还传播疟疾、丝虫病、乙脑、登革热等多种传染性疾病。防治媒介蚊是控制这类疾病流行的重要措施，而对于尚无有效疫苗的疾病（如登革热）和对治疗药物产生抗药性的疾病（如疟疾），媒介控制在预防其发生和流行方面的重要性就显得更加突出［１］。化学防治在过去几十年的蚊类防治中发挥了较大的作用，但化学杀虫剂的长期大量应用却导致蚊类抗药性产生和环境污染等问题。苏云金芽孢杆菌以色列亚种（Ｂｔｉ）是一种对蚊幼虫有特效作用的病原细菌，Ｂｔｉ在孢子形成时可产生４种主要的伴孢晶体杀虫蛋白毒素――Ｃｙｔ１Ａ，Ｃｒｙ４Ａ， Ｃｒｙ４Ｂ和Ｃｒｙ１１Ａ［２］，这些蛋白毒素对蚊有高度的专一性，对包括人类在内的脊椎动物和植物无害，可以完全自然降解，不污染环境，防治对象不易产生抗性，可自身再循环，具有较长的持效期，因此有较广阔的应用和市场前景。 　　悬浮剂是一种环境友好型的剂型，无粉尘危害，生产安全，以水为分散相，没有由有机溶剂而造成的易燃及药害问题，在水中分散性好，粒径细，可对水喷雾［３］。国外主流Ｂｔｉ产品有Ａｂｂｏｔｔ公司开发的２００ ＩＴＵ／ｍｇ飘浮剂、１ ２００ ＩＴＵ／ｍｇ水分散颗粒剂、１ ２００ ＩＴＵ／ｍｇ悬浮剂等，而我国登记的Ｂｔｉ产品只有传统剂型如２００ ＩＴＵ／μＬ悬浮剂、１ ２００ ＩＴＵ／ｍｇ