〖医学〗食用菌液体菌种的制作.ppt

 食用菌液体菌种的制作 1、学习液体菌种制作的原理与方法； 2、掌握液体菌种的质量检测； 3、了解液体菌种在食用菌生产中的优点。  液体菌种是指将食用菌的菌丝在一定的的培养条件下采用液体培养基使其生长增殖形成大量菌丝体或菌丝球，以作为食用菌栽培的原种或栽培种使用。液体菌种必须经显微镜检查后方可用于科研和生产。 液体菌种使用的培养基根据不同菌类营养要求的特点而设计，其主要成分为碳源、氮源、矿质元素与维生素。碳源常用蔗糖和葡萄糖；氮源主要是蛋白胨、酵母粉等；无机盐常添加硫酸镁、磷酸二氢钾等；维生素多用维生素B1。 液体培养基的粘度与菌丝球的形成关系密切。粘度小，形成的菌丝球大，数量少；粘度大，形成的菌丝球小，数量多。在生产中常加入少量的琼脂或玉米粉调节粘度。  液体菌种与传统的固体菌种相比，液体菌种有制作程序简单、生产周期短、污染率低、发菌快、菌龄整齐、接种方便，缩短出菇时间的优点。适合于食用菌的自动化、工厂化栽培。 液体菌种是食用菌栽培的新技术，是食用菌栽培技术的发展方向。 恒温培养箱；恒温摇床；超净工作台；灭菌锅；电炉（1台/组）；  250mL三角烧瓶（1个/人）；500mL或250mL烧杯、量筒（各1个/组）；中长玻璃棒（1根/组），六层纱布（1块/组），接种钩、接种铲（各1支/组）；小刀、棉塞、牛皮纸、橡皮筋； 食用菌母种（1支/组），马铃薯，葡萄糖，磷酸二氢钾，硫酸镁，蛋白胨，氯化钠  1、配方：马铃薯200g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾0.5g、硫酸镁0.5g、蛋白胨2g、氯化钠0.1g，水1000mL，PH自然。  2、培养基制备： a 根据配方和用量称取适量去皮的马铃薯，切块（1cm3大小）后于烧杯中加入一定量的水，在电炉上加热煮沸30min（熟而不烂），用六层纱布过滤后将滤液补充至初始体积 b 按比例向滤液中加入配方中的其它各成份，搅拌（必要时可加热）使各成份充分溶解，（若溶液较浑浊可再过滤一次）再补充至初始体积，冷却（不烫手） ? 5、液体菌种质量检查： （1）培养结束，培养液澄澈透明，悬浮大量菌丝球，并伴有各种菇类特有的香味，因菇种的不同，培养液的色泽有一定的差异。平菇、金针菇的培养液为浅黄色；香菇、猴头菇为黄棕色，清澈透明；木耳为青褐色，粘稠，又香甜味。  * * 食用菌学实验 中南民族大学工商学院实验教学中心环境与生物工程实验分中心 一 实验目的 二 实验原理 三 实验器材 四 实验内容与方法 c 将培养液分装到250mL的三角烧瓶中（80-100ml/瓶），再放入5-10颗玻璃珠，加塞，包扎，灭菌（121℃，30min）  3、接种：待培养液充分冷却至室温后，无菌操作从母种斜面铲取约1cm2 的菌丝体块（勿带过多的培养基），使菌丝面朝上悬浮于液面上；  4、培养：先25℃静止培养2d,待接种菌块萌发长出新菌丝后，再于摇床上振荡（150-180rpm）培养3-4d，观察检测液体菌种的质量。   （2）菌液的质量检查： a 纯度检查： 镜检或平板培养，无细菌、霉菌； b 活力检测： 菌球边缘菌丝分支细密，结晶紫染色着色深，菌丝细胞原生质尚未出现凝集现象和空胞；菌球颜色较浅，变深说明开始或已经老化。老化的液体菌种会自溶成粘糊粥状物； c 菌球大小：80%的菌球直径应小于2mm，数量在1000-1500（500个以上）个/mL，大小均匀，界线分明，不易沉降； d 出菇能力：对于平菇、金针菇、香菇、银耳、木耳等一些担子菌纲的菌类来说，处于旺盛生长时期的菌丝体会出现大量锁状联合。 1 制作液体菌种前应注意哪些问题？ 2 从哪几个方面检测液体菌种的好坏？如何检测？ 3 液体菌种有哪些优缺点？它对食用菌栽培技术的应用及 发展有何影响？ 五 思考题