临床微生物SOP-生殖道标本细菌学检验标准操作规程.doc

1．目的 规范生殖道标本细菌学检验标准操作规程，确保检验结果准确可靠。 2．适用范围 生殖道标本培养或涂片检查。 3．标本 3.1 标本类型 生殖道标本。 3.2 标本采集 3.2.1 女性 由临床医师用无菌棉拭采集阴道、宫颈分泌物。怀疑盆腔厌氧菌感染时，由医师用注射器从阴道后穹处穿刺抽取标本，立即床边接种于厌氧菌平板。 3.2.2 男性 翻转包皮，用肥皂水清洗尿道口，清水冲洗，采集尿道口分泌物。采集前列腺液时，先冲洗尿道和膀胱，用手指从肛门内按摩前列腺，使前列腺液溢出。 3.2.3 梅毒螺旋体标本 从外生殖道的硬下疳处蘸取渗出液，置于载玻片上，加盖玻片后立即送检。 3.3 标本拒收标准 3.3.1 申请单项目与标本不符。 3.3.2 标本不是用无菌容器留取。 4．试剂、仪器 4.1 革兰染液、氧化酶试剂、3%过氧化氢、血琼脂平板、巧克力平板、麦康凯平板、相关生化试剂等。 4.2 VITEK鉴定系统；革兰阴性菌鉴定卡(GNI+)、革兰阴性细菌药敏卡(GNS)、革兰阳性细菌鉴定卡(GPI)、革兰阳性细菌药敏卡(GPS)、真菌鉴定卡(YBC)、药敏纸片、ATB板条等，有效期及储存条件参见试剂说明书。 4.3 接种针、接种环、电热灼烧器、显微镜、孵育箱、C02培养箱等。 5．细菌鉴定和药敏质控 参见《质量管理程序》。 6．检验步骤 接收标本后，立即对标本进行编号、登记。 6.1 涂片检查 6.1.1 革兰染色镜检 观察阴道分泌物中有无细菌，以及细菌形态和染色性，尤其注意观有无白细胞内外的革兰阴性双球菌（淋病奈瑟菌），以及有无覆盖大量革兰阴性菌的上皮细胞（线索细胞，提示可能有阴道加特纳菌感染）。 6.1.2 梅毒螺旋体涂片检查 直接暗视野检查，观察有无纤细、发亮、前后旋转的密螺旋体，或冯泰纳染色，观察有无棕黑色的密螺旋体。 6.2分离培养 6.2.1 一般细菌培养 接种血琼脂平板和麦康凯琼脂平板，置5%～10%CO2 环境条件下，35℃培养18 ～24小时。 6.2.2 病奈瑟菌培养 接种于GC琼脂平板，置5%～10%CO2 条件下，35℃培养18～24小时，察有无较小、灰白色、露滴状菌落形成，进一步生化鉴定。 6.2.3 阴道加德纳菌培养 接种于含5%羊血琼脂平板，在5%～10 %C02环境培养48小时，观察有无针尖大小（0.3～0.5 mm)、圆形、光滑、不透明、不溶血（在人血或兔血琼脂平板上可出现β溶血）的菌落。 6.2.4 结核分枝杆菌培养 参见《分枝杆菌属检验标准操作规程》。 7.操作流程 8．结果报告 报告菌名和抗菌药物药敏试验结果。 9．注意事项 取阴道分泌物之前避免性生活、阴道冲洗和用药。 10. 临床意义 正常的内生殖道是无菌的，而外生殖器（包括男性尿道口和女性阴道）有多种细菌寄生，如尿道口常见有葡萄球菌、类白喉棒状杆菌和非结核分枝杆菌等，阴道常见有乳酸杆菌、双歧杆菌、消化球菌等。查见病原菌提示有细菌感染，如急、慢性前列腺炎，睾丸炎，附睾炎，阴道炎，急、慢性淋病等。常见的病原菌主要有葡萄球菌、肠球菌、淋病奈瑟菌、大肠埃希菌、变形杆菌等。 参考文献 [1] 中国合格评定国家认可委员会．CNAS - GL23:2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的指南．2008 [2] 周庭银编著．临床微生物学诊断与图解．第二版．上海：上海科学技术出版社,2007 [3] 叶应妩，王毓三，申子瑜主编．全国临床检验操作规程．第三版．南京：东南大学出版社，2006 [4] Murray PR. Manual of. Clinical Microbilogy.9th ed. Washington; ASM Press, 2007 [5] IS0 15189:2007医学实验室一质量和能力认可准则．2007 编写人签名 复审人签名 审批人签名 生效日期 姓 名：XX 编写日期:2011-05 姓 名：XXX 复审日期：2011-06 姓 名：XXX 批准日期：2011-06 2011-07 XXXX医院检验科 微生物实验室 生殖道标本细菌学检验 标准操作规程 编号：MYCH/ 版本：第1版 第0次修改 页数：第 1 页 共 4 页 生殖道标本细菌学检验标准操作规程 淋球菌平板，35℃，5%～10%CO2培养18～24h 生殖道标本 涂片染色 血琼脂平板、麦康凯平板35℃培养18～24h 需氧培养 厌氧培养 仪器或手工细菌鉴定及药敏试验 厌氧血琼脂平板，35℃ 厌氧环境培养18～24h 发出报告 观察菌落特征及涂片、染色 厌氧血平板生长 耐氧试验