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第八节 菌种的衰退、复壮和保藏.ppt

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第八节 菌种的衰退、复壮和保藏

第八节 菌种的衰退、复壮和保藏 一、菌种的衰退(degenration) 1. 衰退的表现 1)原有形态形状变得不典型; 2)生长速度变慢; 3)代谢产物生产能力下降; 4)致病菌对宿主侵袭力下降; 5)对外界不良环境的抵抗力下降。 2. 衰退的原因 1)根本原因在于基因自发突变; 2)传代次数的影响,使负突变株的比例逐渐占 了优势; 3)与培养条件有关。 衰退是发生在微生物细胞群体中的一个由量变到质变的逐步演变的过程。 纯种的分离方法 平板划线分离法 菌落纯 平板涂布分离法 平板倾注分离法 用“分离小室”进行单细胞分离 细胞纯 显微操纵器进行单细胞分离 菌丝尖端切割法进行单细胞分离 1. 原理 人为地创造有利于微生物长期休眠的条件,主要是低温、干燥、缺氧。 2. 保藏方法 7种常用方法 (p244表7-13) (1)斜面冰箱保藏法 (2)半固体冰箱保藏法 (3)石蜡油封藏法 (4)甘油悬液保藏法 (5)沙土管保藏法 (6)冷冻干燥保藏法 (7)液氮保藏法 ATCC采用的菌种保藏法: ( American Type Culture Collection ,美国典型菌种保藏中心) 冷冻干燥保藏法 液氮保藏法 CCCCM采用的菌种保藏法: ( China Committee for Culture Collections of Microorganism,中国微生物菌种保藏委员会) 斜面传代法 冷冻干燥保藏法 液氮保藏法 本章重点 一、了解证明核酸是遗传变异物质基础的3个经典实验 比较:基因型与表型,变异与饰变 质粒的概念,特点及主要类型。 二、基因突变和诱变育种 1. 基因突变的类型 2. 基因突变的规律 3. 了解常用诱变剂及其诱变机制 4. 艾姆氏法检测致癌剂的理论依据、方法和优点 5. 了解诱变育种的主要环节及常用的初筛方法; 掌握UV诱变育种的操作程序及注意事项。 6. 筛选营养缺陷型突变株的主要步骤和方法, 淘汰野生型的方法 7. 抗生素高产突变株及抗性突变株的筛选方法。 8. 名词: 营养缺陷型,野生型,原养型,基本培养基, 完全培养基,补充培养基,点突变,转换, 颠换,移码突变,染色体畸变,光复活作用 三、基因重组与杂交育种 1. 了解原核生物和真核微生物基因重组的方式。 名词概念: 转化,转染,转导,普遍转导,局限转导, 低频转导,高频转导,双重溶源菌,接合,性导, Hfr菌株, 溶源转变。 比较: 转化与转染,转导与性导,转导与溶源转变, 普遍转导与局限转导,LFT与HFT 有性生殖与准性生殖, 转化、转导、接合和原生质体融合 2. E. coli F+、F-、Hfr和F’菌株的异同及相互间关系。 3. 原生质体融合的基本操作及优点。 4. 酿酒酵母有性杂交的育种程序。 四、基因工程 名词,基本操作 五、菌种的衰退、复壮与保藏 1. 菌种衰退的表现、原因与防止措施。 2. 菌种保藏的原理与常用的保藏方法。ATCC 和 CCCCM采用的菌种保藏法。 本章内容 第一节 自然界中的微生物 第二节 微生物生态学的研究方法 第三节 微生物活性的测定方法 第四节 微生物在自然界物质循环中的作用 第五节 微生物之间的关系 第六节 微生物与环境治理 第七节 瘤胃微生物生态系统 第八节 产甲烷作用和互养共栖 第二节 微生物生态学的研究方法 一、微生物生态研究中的传统方法 1.样品的采集、富集培养和微生物纯培养分离 土壤和污泥样品采集 水体样品的采集 空气样品的采集 生物体上微生物样品的采

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