复方感冒灵片中对乙酰氨基酚含量测定方法改进.doc

复方感冒灵片中对乙酰氨基酚含量测定方法改进 　　[摘要] 目的 改进高效液相色谱法测定复方感冒灵片中对乙酰氨基酚含量的方法。 方法 采用高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚含量，色谱柱为SHIMADZU VP-ODS 150L×4.6mm，流动相为甲醇-0.5%冰醋酸（20?80），流速1.0mL/min，检测波长249nm，柱温：25℃。 结果 高效液相色谱法中，对乙酰氨基酚在0.0416～0.8320?g范围内线性良好，r=1，平均回收率为98.4%；RSD为1.2%。 结论 该法操作简便、快速，结果准确。 [关键词] 复方感冒灵片；高效液相色谱法；对乙酰氨基酚；含量测定 [中图分类号] R927 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2013）21-59-03 复方感冒灵片收载于1997年《卫生部药品标准中药成分制剂》第十二册，主要由金银花、野菊花、三叉苦、南板蓝根、岗梅、对乙酰氨基酚、马来酸氯苯那敏、咖啡因等8种中药流浸膏以及适量辅料制成，成分较复杂。具有辛凉解表，清热解毒的功效，临床上用于风热感冒及湿病之发热、微恶风寒、头身痛、口干而渴、鼻塞涕浊、咽喉红肿疼痛、咳嗽、痰黄粘稠等，对乙酰氨基酚（C8H9NO2）是本品的主要成分之一，原标准用亚硝酸钠滴定分析法，测定对乙酰氨基酚含量，因采用外指示剂，其滴定终点判断因人而异导致结果波动较大，为了有效控制该制剂的质量，本研究采用HPLC法测定复方感冒灵片中对乙酰氨基酚含量[1-4]，结果准确，重现性好，为该制剂的质量控制提供了实验依据。 1 仪器、试药及处方 1.1 仪器 Agilent 1100高效液相色谱仪，电子天平（瑞士，型号：BP211D、AB204-N），数控超声波清洗器（昆山，型号：KQ-250DE）。 1.2 试剂与试药 甲醇（色谱纯，天津市四友精细化学品有限公司），超纯水（ACY-1002-U超低元素型超纯水机），冰醋酸（广州化学试剂厂），对乙酰氨基酚对照品（中国药品生物制品检定所，批号：100018-200408），复方感冒灵样品（供试品1：海南海力生，批号：2130102；供试品2：广州嘉禾，批号121202；供试品3：广州一力，批号：313001），其他试剂均为分析醇。 2 高效液相色谱方法与结果 2.1 色谱条件与系统活用性试验 色谱柱为SHIMADZU VP-ODS 150L×4.6mm；流动相：甲醇-0.5%冰醋酸（20∶80）；检测波长：249nm，体积流量为1.0mL/min，柱温为25℃，进样量10?L。 2.2 对照品溶液制备 取对乙酰氨基酚对照品适量，精密称定，加流动相制成每毫升含40?g的溶液，即得。 2.3 供试品溶液制备 取本品10片，除去糖衣，精密称定，研细，精密称取适量的（相当于对乙酰氨基酚2mg）置50mL量瓶中，加流动相约35mL，超声处理10min（功率300W，频率40kHz），放冷，加流动相至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。 2.4 阴性对照液的制备 按处方及工艺制备不含对乙酰氨基酚的样品，再按照2.3项下制备成阴性对照液。 2.5 测定法 分别精密吸取上述3种溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，记录液相色谱图。由色谱图可知，在与对照品色谱峰相应的位置上供试品具有相同保留时间的色谱峰，阴性对照液在此峰位无吸收。见图1。 2.6 线性范围 分别精密量取对乙酰氨基酚对照品溶液适量，溶液分别进样，进样量分别为1、2、5、10、20μL。记录峰面积，以质量浓度（C）为横坐标，对乙酰氨基酚峰面积（S）为纵坐标，得回归方程S=3997.2C+1.7014，r=1，结果表明，对乙酰氨基酚在0.0416～0.8320?g范围内与峰面积线性关系良好。 2.7 精密度试验 取2.2项下同一份对照品溶液，按2.1项下的色谱条件，连续进样6次，对乙酰氨基酚的峰面积RSD为0.23%。 2.8 重复性试验 取同一批样品（广州嘉禾121202）6份，分别按“2.3”项下方法制备，精密吸取10?L进样，测得对乙酰氨基酚平均含量99.8%，RSD为0.75%。 2.9 稳定性试验 取2.8项下同一份样品溶液，分别0、4、8、12、24、48h分别进行测定，计算对乙酰氨基酚峰面积的RSD为0.21%，说明被测溶液在48h内稳定。 2.10 加样回收率试验 取已知含量的供试品（广州嘉禾121202），精密称定，加入适量的对乙酰氨基酚对照品，按2.3项下的制备方法制备，测定，结果见表1。 2.11 样品测定 取不同批号本品各10片，除去糖衣，精密称定，