GFP标记的重组腺病毒GDNF基因在脑缺血大鼠脑内的表达.pdf

泸州医学院学报 2010年 第 33卷 第 4期 JournalofLuzhouMedicalCoHege Vo1．33 No．4 2010 353 鼍| GFP标记的重组腺病毒 GDNF基因在 脑缺血大鼠脑内的表达 高小青 ，杜 杰 ，陈 波 ，杨朝鲜 ，袁琼兰 (泸州医学院：解剖学教研室及神经生物学研究室 ；-教务处，四川泸州 646000；。同济大学解剖学教研室) 摘 要 目的：研究绿色荧光蛋 白(GFP)标记的重组腺病毒胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因在脑缺血大鼠脑 内的表 达。方法：采用改良的线栓法制作脑缺血再灌注模型，3d后用脑立体定位仪经侧脑室注射生理盐水或 GDNF重组腺病毒液 ，注 射前及注射后 4d对大鼠进行神经功能损伤程度评分 (NSS)。注射后 4d麻醉处死大 鼠，脑组织石蜡包埋 。抗 GFP免疫组织化学方 法观察重组腺病毒 GDNF基 因在脑 内的表达 。结果：注射后 4d．GDNF组与 NS组相 比，NSS评分显著降低 ：GDNF组，注射后 4d，缺血侧纹状体内和梗死灶周围有大量 GFP阳性细胞。结论：腺病毒介导的GDNF基因在脑缺血大鼠脑内能直接感染病灶周 围神经细胞，表达 GDNF蛋白，改善缺血后大 鼠的神经功能状况。 关键词 胶质细胞源性神经营养因子；脑缺血；大鼠 中图分类号 R743．31 文献标识码 A 文章编号 1000—2669(2010)4—0353—03 THE EXPRESSION OF GFP—LABELED RECoM BINANT ADENoVIRUSGDNFGENE IN BRAIN oF RATSW ITH CEREBRAL ISCHEM IA GaoXiaoqing，etal DepartmentofNeurobiologyandAnatomy,LuzhouMedicalCollege AbstractObjective：ToinvestigatetheexpressionofGFP-labeledrecombinantadenovirusGDNFgenein ratbrain afterfocalcerebralischemic reperfusion．Methods：The modelofmiddle cerebralartery occlusion (MCAO)andreperfusionweresetupandsalineorsolutionofrecombinantadenovirusGDNFgenewereinjected intothelateralcerebralventricleofMACO modelafterreperfusion3daysbystereotaxisinstrument．Neurological severityscore(NSS)testswereperformedinallgroupsbeforeinjectionand4dafterinjection．Ratswereanes— thetizedandsacrificed4dafterinjection．Anti—GFPimmunohistochcmistrywasusedtochecktheexpressionof recombinantadenovirusGDNF gene．Results：NeurologicalSeverityScoreinGDNF groupwassignificantlylower comparedwithNSgroup4dafterinjection．InGDNFgroup，alargenumberofGFPpositivecellswereobserved atthestriatum inischemicsideandaroundinfarction 4dafterinjection．Conclusion：Adenovirus-medi