PBMC对B7-2基因修饰的肝癌细胞Bel-7402体外杀伤作用的研究.pdfVIP

广东药学院学报 JournalofGuangdongPharmaceuticalCollege Jun．2010，26(3) PBMC对 B7—2基因修饰的肝癌细胞 Bel一7402 体外杀伤作用的研究 刘洪洲，区裕升，冯成千，郭亨鹏，胡伟锋，邵红伟，黄树林 (广东药学院 生命科学与生物制药学院，广东 广州510006) 摘要：目的研究B7—2基因修饰肿瘤后对T细胞活化的影响，探索B7—2在肿瘤免疫治疗中的作用。方法 构建B7—2基因的表达载体，转染 Bel一7402细胞，与外周血单核细胞 (PBMC)共孵育 ，利用流式细胞术 (FCM)检测Bel-7402细胞的凋亡。结果B7-2基因修饰的Be1—7402细胞和PBMC细胞共培养4h后 ，凋 亡率为 12．7％，与对照组(7．5％)比较，细胞凋亡率显著增加 (P0．O1)。结论 B7—2基因修饰能够增 强肿瘤细胞对淋巴细胞的活化作用，为基于B7—2的抗肿瘤治疗奠定了基础。 关键词：Bel-7402细胞；PBMC；流式细胞术；脂质体；凋亡 中图分类号：Q812 文献标识码：A doi：10．3969／j．issn．1006—8783．2010．03．024 文章编号：1006—8783(2010)o3—0310—04 PBM C killing-effecton theB7-2gene-modifiedBel-7402hepatomacellsinvitro LIU Hong—zhou，OU Yu—sheng，FENG Cheng—qian，GUO Heng—peng，HU Wei—feng，SHAO Hong—wei， HUANG Shu—lin (SchoolofLfieScienc~andBiopharmaceutics，GuangdongPharmaceuticalCollege，Guangzhou，Guangdong 510006，China) Abstract：ObjectiveTostudytheinfluenceofB7—2genemodifiedtumorcellsonTcellsactivation，andthe roleofB7-2 in tumorimmunotherapy，and to explore new ideason designing the malignanttumor comprehensive treatmentbased on B7·2． M ethods Recombinant B7—2 gene expression vector was constructed，andBel-7402 cellsweretranfected，andthen CO—culturedwithperipheralbloodmononuclear cells(PBMC)，andBel-7402cellsapoptosisweredetectedsubsequentlybyfloweytometry (FCM)． ResultsBel-7402cellsmodifiedbyB7-2genewereCO—culturedwithPBMCfor4h，andtheapoptosisrate detectedbyflow eytometrywas12．7％ ．whichwassignificantlyincreasedcomparedwiththatinthecontrol group(7．5％)(P0．01)．ConclusionB7-2gene—modifiedtumorceilscouldenhancelymphocytic activation，whichsuggestingthefeasibilityofantitumortreatmentbasedonB7—2． Keywords：Bel-7402cells；PBMC；flow cytometry；liposome；apoptosis B7分子提供的共刺激信号是T细胞活化所必 为肿瘤逃逸的重要因素之一。经典的 B7一l／B7—2- 需的，而很多肿瘤 B7低表达或缺失，以致于T细胞 CD28信号途径 中的B7-1是二聚体，而 B72·是单 因缺少激活所需要的第二信号而处于无能状态 ，成 体，且B7—1更倾 向于和 CTLA-4结合参与免疫抑制