乳腺癌HER2基因FISH检测的意义.ppt

乳腺癌HER2基因 FISH检测的意义 内容 我国女性的乳腺癌发病率为20.1/10万 近数十年来，国内、外在治疗方法上虽然经过了多方面的改进，但其病死率迄今并未见明显降低，可手术患者总的10 年生存率在40%～ 50% 左右，若手术时已经发生淋巴转移，则降为25% 左右 早发现、早治疗，以及采取正确、有效的检测、治疗方式是治疗乳腺癌的关键 HER2－人表皮生长因子受体2 HER2 受体跨膜二聚体的信号传导途径 HER2过度表达 HER2 状态: 预示肿瘤对治疗的反应 HER2阳性状态的患者无病生存期亦缩短 HER2检测的准确性非常重要 检测方法包括：免疫组织化学（IHC）、荧光原位杂交（FISH）、酶联免疫分析（EIA）、酶联免疫吸附分析（ELISA）、聚合酶链反应（PCR）等。 在上面提到的检测方法中FISH是其中一种比较可靠的检测方法。 HER2状态测定方法的比较 运用FISH方法检测基因扩增 FISH显示乳腺癌HER2基因的扩增数（桔红色信号为HER2基因，绿色信号为17号染色体的着色颗粒） 目前HER2测定中的推荐意见 Fish信号计数指导表 IHC/FISH检测HER2基因 赫赛汀靶向HER2的人源化单抗 赫赛汀作用机制 赫赛汀?一线联合多西紫杉醇延缓疾病进展时间 * * 乳腺癌在我国的发病情况 1 HER2作为乳腺癌预后和预测的指标 2 HER2状态的测定 3 赫赛汀的应用 4 细胞膜 细胞质 细胞外配体结合区 (632 氨基酸) 跨膜区 (22氨基酸) 细胞内区 (580氨基酸) 具有酪氨酸激酶活性 信号传导 至细胞核 细胞核 接合部 酪氨酸激酶 活性部分 细胞浆 细胞膜 生长因子 癌基因活化 细胞分裂 1 = - 基因拷贝数 2 = - mRNA 转录 3 = - 细胞表面受体蛋白表达 4 = - 细胞外受体功能域释放 A = HER2 DNA B = HER2 mRNA C = HER2 receptor protein 正常 扩增/过度表达 细胞核 细胞质 细胞膜 1 2 3 4 C B A HER2阳性状态与乳腺肿瘤的预后差相关 HER2是肿瘤复发和总生存期长短的独立预后因子 HER2是有别于肿瘤大小、淋巴结及激素受体外的重要预后因子 1.00 0.75 0.50 0.25 0 0 24 48 72 96 120 144 无扩增 扩增 基因扩增: 10 拷贝数 无基因扩增: 3拷贝数 临界值: 不包括 死亡时间 (月数) Log rank p0.001 100 80 60 40 20 0 无病生存概率 死亡时间 (月数) HER2 基因 3 拷贝数 HER2基因 3 3 拷贝数 对数秩检验 p=0.001 淋巴结阴性 淋巴结阳性 是 否 可针对治疗及预后 可针对治疗 不能针对治疗 FDA批准 否 是 是 是 尚无 有商业化试剂盒 是 否 是 是 困难 可在穿刺活检标本中完成 否 否 否 是 是 受储存影响 否 否 是 是 是 可在切片上完成 基因扩增 蛋白过度表达 基因扩增 蛋白过度表达 蛋白过度表达 测定异常目标 定量 PCR ELISA (血清) FISH IHC 石蜡包埋 组织 IHC 冰冻/新鲜 组织 方法 荧光原位杂交 Fluorescence In Situ Hybridization 是一种分子细胞遗传学技术，通过荧光标记的DNA探针与细胞核内的DNA靶序列杂交。在荧光显微镜下，与细胞和（或）组织原位观察并分析细胞核内杂交于DNA靶序列的多种猜测探针信号，以获得细胞内多条染色体（或染色体片段）或多种基因状态的信息。 FISH 重新检测 FISH 3+ 0/1+ 2+ IHC FISH 重新检测 - + - + 肿瘤标本 （石蜡包埋） 赫赛汀? 治疗 赫赛汀? 治疗 赫赛汀? 治疗 + 正常 正常 HER2基因低度表达 HER2基因高度表达 0 1+ 2+ 3+ 95% 人源化, 5% 鼠抗，具有高度亲和性 (Kd=0.1nM) 和特异性，显著降低免疫原性(HAMA) 用于治疗HER2阳性乳腺癌 MBC：生存率提高达45% EBC：复发风险降低50％ HER2 过度表达细胞 赫赛汀?与HER2受体结合 生长信号 被阻断 抑制肿瘤 细胞生长 赫赛汀?与过度表达HER2受体的细胞表面结合 诱导NK细胞和巨噬细胞攻击肿瘤细胞 NK细胞和巨噬细胞释放各种活性因子溶解肿瘤细胞 巨噬细胞 NK细胞