中成药蒽醌类化合物的鉴定.ppt

中成药蒽醌化合物的鉴定 中药饮片及中成药的鉴定均参照 《中华人民共和国药典》2015版 决明子的鉴定标准 一：来源鉴定； 二：显微鉴定； 三：甲醇浸出物检查TLC(通则0502)； 四：水分检测（通则0832）； 五：黄曲霉素测定（通则2351）； 六：含量测定HPLC（通则0512）； 七：对照品溶液的制备； 八：供试品溶液的制备 决明子鉴定 TLC法： 一：浸渍提取取本品粉末1g，加甲醇10ml，浸渍1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，再加盐酸1ml，置水浴上加热30分钟，立即冷却，用乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液。 二：对照品制备另取橙黄决明素对照品、大黄酚对照品，加无水乙醇一乙酸乙酯（2：1）制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。 三：点样照薄层色谱法（通则0502）吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以石油醚（30～60℃）-丙酮（2：1）为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；置氨蒸气中熏后，斑点变为亮黄色（橙黄决明素）和粉红色（大黄酚）。 决明子检测TLC法流程图 决明子粉末1g+甲醇浸渍1小时 滤过蒸干 残渣加水10ml溶解+盐酸1ml 水浴加热30分钟冷却 乙醚提取2次每次20ml 乙醚层合并蒸干 残渣加三氯甲烷1ml溶解 供试品2 大黄酚 水层 供试品1 橙黄决明素 橙黄决明素；大黄酚 乙醇+乙酸乙酯（2:1） (1ml/1mg混悬) 对照品1；对照品2 TLC点样；展开 供试品1；对照品1分别点样2μl （展开剂石油醚加丙酮2:1） 氨气熏显色 两个斑点比较计算Rf值 HPLC法：色谱条件与系统适用性试验 含量测定：照高效液相色谱法（通则0512） 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1%磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为284nm。理论板数按橙黄决明素峰计算应不低于3000。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪，测定，既得。 本品按干燥品计算，大黄酚（C16H10O4）不得少于0.12%，含橙黄决明素（C17H16O7）不得少于0.080%。 制何首乌的鉴定标准 一：来源鉴定（参照何首乌生药，黑豆制法）； 黑豆汁拌匀照炖法（通则0213）； 照蒸法（通则0213） 二：显微鉴定； 三：水分检测（通则0832）； 四：照醇溶液浸出物检查，通则（2201)，用乙醇为溶剂，不得少于5.0% 五：含量测定HPLC（通则0512）； 二苯乙烯苷 （避光操作）。 取本品粉末（过四号筛）约0.2g，精密称定，照何首乌药材[含量测定]项下的方法测定。本品按干燥品计算，含2，3，5，4’一四羟基二苯乙烯-2-O-p-D-葡萄糖苷（C20H2209）不得少于0.70%。 游离蕙醌（制何首乌） 照高效液相色谱法（通则0512）测定。 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷墓硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇0.1%磷酸溶液（80：20）为流动相；检测波长为254nm。理论板数按大黄素峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备 取大黄素对照品、大黄素甲醚对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每1ml含大黄素80μg、大黄素甲醚40μg的溶液，即得。 供试品溶液的制备 取本品粉末（过四号筛）约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，加热回流1小时，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品按干燥品计算，含游离蒽醌以大黄素（C15H1005）和大黄素甲醚（C16H12O5）的总量计，不得少于0.10%。 品名血脂宁丸856 处方决明子、山楂、荷叶、制何首乌 制法以上四味，与白糖粉碎成细粉，过筛，混匀。 每100g粉末加炼蜜70～90g制成大蜜丸，即得。 性状本品为棕褐色的大蜜丸；味甜、酸。 鉴别（一）TLC法 （1）溶解取本品9g，剪碎，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，加盐酸1ml，加热回流30分钟，放冷，用乙醚振摇提取2次，每次20ml，合并乙醚提取液，蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液。 对照品另取大黄酚对照品、大黄素甲醚对照品，加三氯甲烷制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。 点样照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取供试品溶液4～6μl、对照品溶液2～4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（30～60℃）—甲酸乙酯—甲酸（15：5：1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（