丰肉结海绵相关真菌产黄青霉HLS111菌株活性代谢产物研究.PDF

174 中国医药生物技术 2014 年 6 月第 9 卷第 3 期 Chin Med Biotechnol, June 2014, Vol. 9, No. 3 DOI:10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2014.03.003 ·论著· 丰肉结海绵相关真菌产黄青霉 HLS111 菌株活性代谢产物研究 巩婷，孙传英，甄心，邱君志，杨金玲，朱平 【摘要】 本课题组前期对从我国南海水域采集的丰肉 目的 对我国南海水域丰肉结海绵相关真菌产黄青霉菌 结海绵（Gelliodes carnosa ）相关真菌的生物多样 HLS111 的活性代谢产物进行研究。 性[3]及化学多样性[4-6]进行了相关研究。本论文的研 方法 采用 HPLC-DAD 技术与活性筛选相结合的方法，通 究对象为丰肉结海绵中一株真菌 HLS111 （GenBank 过硅胶柱、凝胶柱及 HPLC 等色谱方法对 HLS111 发酵产 accession No. FJ770066 ），通过 16s rRNA 分子生物 物进行分离纯化；通过核磁共振、质谱等波谱分析手段对分 学方法初步判定该菌株为产黄青霉（Penicillium [3] 离得到的化合物进行结构鉴定；并对单体化合物进行抗肿 chrysogenum ） 。活性筛选发现该菌株的发酵产物 瘤、抗 HIV 、抗炎活性测定。 显示了较强的抗肿瘤活性。通过对该菌株的大米固 结果 分离得到 12 个化合物。其中 2 个黑麦酮酸类化合 体发酵物进行提取分离，目前已从该菌株的发酵产 物：黑麦酮酸 F （1）和 D （2 ）；4 个生物碱类化合物：环 物中分离得到了 12 个化合物，其中黑麦酮酸类化 合物被初步认定为该菌株的主要抗肿瘤活性成分。 （L-色氨酸-L-苯丙氨酸）（3 ）、citreoindole （4 ）、meleagrin （5 ）、脑苷脂B （6 ）；4 个甾体类化合物：麦角甾醇（7 ）、 (22E,24R)-5 α,8α- 过氧化麦角甾-6,22-烯-3 β- 醇（8 ）、 1 材料与方法 1.1 材料 globosterol （9 ）、β-谷甾醇（10）；1 个三萜类化合物： 24-亚甲基环木菠萝烷醇-反式阿魏酸（11）；1 个蒽醌类化 1.1.1 菌株 产黄青霉菌株 HLS111 为本实验室 合物：大黄素（12）。对化合物 4 的氢谱、碳谱数据进行了 保存。 归属。初步的药理研究表明，黑麦酮酸类化合物表现出较强 1.1.2 培养基 的抗肿瘤活性，化合物 citreoindole 表现出一定的抗 HIV ⑴斜面培养基（YPD 培养基）：酵母提取物 及抗炎活性。 10 g/L、胰蛋白胨 10 g/L 、葡萄糖 20 g/L 、天然海 水，调 pH 6.0 ，加 1.5% 琼脂，121 ℃ 高压蒸汽 结论 海绵相关真菌产黄青霉 HLS111 菌株体现了次生代 灭菌 20 min 。 谢产物化学结构的多样性；黑麦酮酸类化合物为产黄青霉 ⑵种子培养基（YM 培养基）：麦芽提取物 HLS111 的主要抗肿瘤活性成分。