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从石南海岸分离海洋酵母及其性能
Isolation and some properties of marine yeast form Shinan Coast
Won Sin Kim
从石南海岸分离海洋酵母及其性能
Isolation and characterization of the yeast strains which is useful to brewing industry from Korean coast.
研究目的是从韩国海岸分离鉴定啤酒酵母菌及其在酿造工业中的应用。
研究目的
Wonkwang University
海水的采集是微生物活性较高的5月至8月分别在韩国西海三处,南海2处和东海4处,采集,0.45um的过滤膜过滤,并用海水洗涤滤膜,采集膜上的微生物用于一轮筛选。
海水采集
Filtration of the sea water with 0.45 um membrane filter.
Washing the filter by 1.5 ml sea water.
Incubation of 100 ul washed sea water on selection agar medium in anaerobic condition for 5 days.
Selection of single colony.
Incubation of 200 ul of the single colony in 5 ml Koji medium.
Measuring of CO2 evolution rate.
选择和小规模发酵试验
采集的海水经0.45um滤膜过滤后,用1.5 ml相同海水洗涤。取100ul涂布于YPD琼脂培养基,25℃厌氧培养7天,共选2000多个克隆,利用曲进行发酵实验,从신안筛选出3个、삼척筛选出1个高效产乙醇能力的菌株。
Strains
Alcohol (%)
Y89-5-3
14.3
S5
12.5
S6
15.3
S7
12.0
SC2
11.5
30%葡萄糖培养基中的发酵速度
调查了筛选出的4个菌株和1个对照菌株利用30 % 葡萄糖生产乙醇能力,结果S6菌珠以15.3%的乙醇生产能力优秀于对照菌。
因此,对乙醇生产能力最出色的S6菌进行了生理特性调查。
培养基初始PH值的影响
除了pH2以外,从PH 3.2开始S6菌株均能较稳定的生长
研究初始培养基中的乙醇浓度对菌株生长条件的影响,结果乙醇浓度为7%为止,菌株增值速度随着乙醇浓度增加而减慢,但是随着时间的增长又有慢慢恢复的趋势,但是浓度为10 %的时候增值完全被抑制。
初始NaCl浓度的影响
研究初始培养基中的氯化钠浓度对菌株生长条件的影响,结果菌株增值速度随着氯化钠浓度增加而减慢,但是随着时间的增长又有慢慢恢复的趋势,在海水2倍浓度的7%的时候,生长减慢但是随着时间的增长增值速度在增加。
Glucose
+
Glycerol
-
2-Keto-D-Gluconate
-
Arabinose
-
Xylose
-
Adinotol
-
Xylose
-
Galactose
+
Inositol
-
Sorbitol
Α-Methyl-D-Glucoside
+
N-acetyl-D-Glucosamine
-
Cellobiose
-
Lactose
-
Maltose
+
Saccharose
+
Trehalose
+
Melezitose
-
Raffinose
+
同化试验
甘油
2-酮基-D-葡萄糖酸
阿拉伯糖
山梨醇
纤维二糖
蔗糖
棉子糖
海藻糖
乳糖
Α-甲基-D-葡糖
半乳糖
研究对不同碳源的代谢能力,结果与一般酵母的碳源代谢类似。
栽培温度效应
研究培养温度对增值产生的影响,结果显示,在40°C时增殖速度很慢,但随着时间的推移有恢复的趋势,在45°C时菌株完全没有增殖。
S6菌株的鉴定
通过18S rRNA 测序、Gene Bank data homology search分析,S6菌株的鉴定结果与S.cerevisiae Z75578菌有99%的相似性,鉴定为6rbswnsms S cerevisiae。
红薯烧酒发酵试验
利用S6菌株酿造红薯烧酒调查其特性。
Time
3 days
4 days
6 days
Cell density
106 cells/ml
Viability
(%)
Alcohol
(%)
Cell density
106 cells/ml
Viability
(%)
Alcohol
(%)
Cell density
106 cells/ml
Viability
(%)
Alcohol
(%)
Y89-
5-3
4.7
85.2
12.2
9.4
54.8
14.9
10.7
38
15.2
S6
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