开窍醒脑滴鼻剂定量质量标准方法学探究.doc

开窍醒脑滴鼻剂定量质量标准方法学探究 　　[摘要] 目的 建立开窍醒脑滴鼻剂的含量测定方法。 方法 采用高效液相色谱法对栀子苷、姜黄素含量进行测定；采用气相色谱法对冰片、麝香酮含量进行测定。 结果 桅子苷在30～150?g/mL范围内、姜黄素在4～40?g/mL范围内线性关系良好，r≥0.9997（n=7）。麝香酮在0.005～0.25?g/mL范围内、右旋龙脑在0.05～2.56?g/mL范围内线性关系良好，r≥0.9997（n=6）。 结论 本研究建立的栀子苷、姜黄素、冰片和麝香酮等的含量测定方法灵敏、准确、可靠，且重现性好，可用于开窍醒脑滴鼻剂的含量测定质量控制。 [关键词] 开窍醒脑；滴鼻剂；定量；质量标准 [中图分类号] R338.63 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2013）17-41-04 开窍醒脑滴鼻剂由麝香提取物、天然冰片、郁金姜黄素、栀子苷等组成，制成一种滴鼻剂，具有开窍醒脑的功效。开窍醒脑滴鼻剂是鼻途径脑靶向给药的新剂型，采用微乳纳米粒技术、鼻黏膜渗透促进剂等，通过鼻腔黏膜吸收，从而发挥全身作用。研究的中药醒脑开窍中药微乳滴鼻剂，拟开发中药新药，并制定其定量的标准研究。 1 仪器与试药 1.1 仪器 2450型紫外-可见分光光度计（日本岛津公司）、DV215CD型电子分析天平（美国奥豪斯公司）、高效液相色谱仪（岛津LC-10A，N2000色谱工作站）、气相色谱仪（ShimadzuGC-2010Plus）。 1.2 试药 开窍醒脑滴鼻剂（自制，批20110325，规格：2mL/瓶；麝香酮（批号110719-201006）、冰片（右旋龙脑，批号：110743-200905）、姜黄素（批号110823-201004）、栀子苷（批号110749-200714）、樟脑（批号110747-201008）、异龙脑（批号111512-200201）标准品均购自中国药品生物制品检定所，乙腈为HPLC专用，其余试剂均为AR级，水为纯化水。 2 方法与结果 2.1 栀子苷含量测定[1-3] 2.1.1 色谱条件 参照《中国药典》2010年版一部中栀子的测定方法，采用Kromasmil-C18-ODS色谱柱，流动相为以乙睛-水（15∶85），流速为1.0mL/min，检测波长为238nm，柱温为室温，进样量为20μL。 2.1.2 溶液制备 吸取滴鼻剂5mL，置水浴蒸干，残渣用甲醇振摇提取3次，每次5mL，合并甲醇液，0.45?m滤膜滤过，并用甲醇定容至25mL，作为供试品溶液；精密称取栀子苷对照品适量，加甲醇制成1mg/mL的桅子苷标准品溶液。 2.1.3 专属性试验 依处方量称取除桅子苷外的其他药味制备滴鼻剂，按照2.1.2项下供试品溶液制备方法制备阴性样品溶液，依法测定。结果表明：阴性对照液在与对照品相同保留时间处，未见色谱峰，说明阴性样品无干扰。其结果见图1。 2.1.4 标准曲线的绘制 精密量取1mg/mL的桅子苷标准品溶液0.30、0.50、0.70、0.90、1.10、1.30、1.50mL，置l0mL量瓶中，加入流动相稀释至刻度，混匀，进行测定。以标准品峰面积-浓度（?g/mL）绘制标准曲线。结果表明：桅子苷在30～150?g/mL范围内线性关系良好，回归方程为Y=16470X+4980.3，r=0.9997。 2.1.5 精密度 吸取2.1.2项下栀子苷对照品溶液0.9mL，重复进样5次，测得峰面积，计算相对标准偏差RSD为0.52%，结果说明仪器精密度较好。 A B C A：栀子苷对照品；B：供试品；C：栀子阴性样品 2.1.6 重复性 取同一批滴鼻剂，精密称取5份，分别照2.1.2项下制备方法制成供试品溶液，依法测定，栀子苷含量的RSD为1.08%。表明本法重复性良好。 2.1.7 稳定性 取同一滴鼻剂供试品溶液，室温下放置0、2、4、6、8、12、24h后，进样测定，峰面积RSD为0.48%。结果表明供试品溶液在24h内稳定性良好。 2.1.8 加样回收率试验 精密吸取己知含量的同一批滴鼻剂（批号含量1.1285mg/mL）3份，加入一定量的栀子苷标准品溶液，按照2.1.2项下制备方法制成供试品溶液，依法测定，其结果见表1。 2.1.9 样品含量测定 精密称取3批样品（批20110325各约5mL。按照2.1.2项下供试品制备方法制备，依法测定。结果：3批样品中栀子苷的含量分别为1.1175mg/mL、1.0784mg/mL、1.0924mg/mL