中药新药毒理学研究.ppt

④2级：内膜斑块占管腔面积的1/2； ⑤内膜斑块占管腔面积大于1/2； ⑥4级：管腔几乎全被斑块堵塞。 光镜和电镜：观察内膜泡沫细胞数及中膜完整平滑肌层数。 （三）?? 其它分析的指标 计算肝系数：动物每100g体重含肝重克数。 观察肝组织学改变：肝脏的脂肪变性和泡沫细胞数镜检分级。 测定脂质过氧化物（LPO）和氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）。 血液流变学指标（浓、黏、凝、聚状态）。 抗糖尿病中药药效研究方法 糖 尿 病 1型 10% 胰岛素依赖型 糖尿病 2型 90% 非胰岛素依赖型 1型糖尿病的动物模型 1.手术 切除胰腺 犬 高糖饮食——胰岛B细胞 结扎胰管 ——1型糖尿病 1型糖尿病的动物模型 2.化学物质破坏胰岛β细胞 四氧嘧啶—超氧自由基—B细胞内DNA损伤—mRNA 功能受损——合成胰岛素 腹腔注射 方法：大鼠给予1%一5%的四氧嘧啶一次 （200 mg/kg） 尾静脉 ——24 h后高血糖 （90 mg/kg） 1型糖尿病的动物模型 链尿酶素(SZI) 一次大剂量—速发型糖尿病—胰岛B细胞直接受损 多次小剂量—迟发型糖尿病—T淋巴细胞介导(可能) 正常动物——注射链尿酶素 72小时 测定血糖 3.自发性糖尿病动物模型 中国地鼠——先天胰岛β细胞受损——胰岛素缺乏——血糖升高——类似1型糖尿病 1型糖尿病的动物模型 1型糖尿病的动物模型 4.病毒诱导 鼠脑炎病毒 成年小鼠胰岛B细胞脱颗粒— 柯萨奇病毒 胰岛B细胞破坏—1型糖尿病模型 2型糖尿病的动物模型 1. 特殊膳食诱导 过量 高蛋白 饮食动物—— β细胞萎缩 高脂 —— 2型糖尿病 高糖 给动物喂高热量饲料——8~10周——动物肥胖、高血脂、高胰岛素血症及胰岛素抵抗。 2.小剂量注射SZI加特殊膳食诱导 2型糖尿病的动物模型 3.催肥法 神经性糖尿病 注射金硫葡萄糖——破坏下丘脑内侧核—— 饱食中枢——贪食——催肥——高血糖 2型糖尿病的动物模型 肥胖雌性小鼠一次腹腔注射——金硫葡萄糖 800 ms/kg——血糖升高 2型糖尿病的动物模型 4.注射激素 糖皮质激素、生长激素——促进糖原异生,抑制外周组织葡萄糖的利用——降低胰岛素作用 肾上腺皮质素模型建立法： 肾上腺皮质激素500ug/kg腹腔注射 大鼠 葡萄糖1g/kg的溶液灌胃 离体模型 原代细胞培养 糖尿病动物 组织匀浆 特定的细胞株 离体模型 胰腺 大鼠——胰岛或β细胞——促胰岛素分泌作用 研究新药 作用机制 离体模型 肝脏 肝细胞 肝细胞膜 增强糖原的合成 抑制糖原分解 肝匀浆 肝糖原磷酸化酶抑制剂 CP-91149 催化糖原转变成葡萄糖 离体模型 脂肪 原代培养脂肪细胞 葡萄糖摄取、胰岛素敏感性 脂肪细胞株 胰岛素信号传导、脂解 罗格列酮 离体模型 酶活性 晶状体—醛糖还原酶—筛选醛糖还原酶抑制剂—依帕司特 小肠—葡萄糖苷酶—筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂—拜糖苹