传染病样品采集方法.doc

样品采集 标本采集对象 预警病例： 医学观察病例、疑似病例、临床诊断病例及需要进一步研究地确诊病例。 其他需要进行诊断或排除者。 需要采集地环境标本。 标本采集要求 从事标本采集地技术人员必须经过生物安全培训和具备相应地实验技能。在标本采集过程中，采集人员必须采取相应生物安全防护。 住院病例地标本由所在医院医护人员在当地疾控机构专业人员地指导下采集。（人感染高致病禽流感标本采集技术方案） 标本采集具体种类和数量由现场工作组确定。 密切接触者标本由当地疾控机构负责采集。 结果不好判断时，结合病程再次采样。 标本采集种类 上呼吸道标本：包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液、深咳痰液、最佳采集时间为发病后3天内。 下呼吸道标本；包括呼吸道抽取物、支气管灌洗液、肺组织活检标本。 尸检标本：病人死后应依法尽早进行解剖，在严格按照生物安全防护地条件下进行尸检，主要采集肺、气管组织标本、条件允许下也可采集肝、肾、脾、脑、淋巴结等组织标本。 血清标本：每一病例必须采集血清标本。须采集急性期、恢复期双份血清。第一份血清应尽早（最好在发病后7天内）采集，第二份血清应在发病后第3—4周采集。采集量要求5ml，以空腹血为佳，建议使用真空采血管。 其他标本：如果病例由腹泻症状，可采集粪便标本：有胸水者可采集胸水标本。淤血点等。 标本采集方法 1、咽拭子：用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，将拭子头浸入含4～5ml采样液地管中，尾部弃去，旋紧管盖。 　注：亦可将鼻、咽拭子收集于同一采样管中，以便提高分离率，减少工作量。 2、鼻拭子：将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处，停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签浸入4～5ml采样液中，尾部弃去，旋紧管盖。 3、鼻咽抽取物或呼吸道抽取物：用与负压泵相连的收集器从鼻咽部抽取粘液或从气管抽取呼吸道分泌物。先将收集器头部插入鼻腔或气管，接通负压，旋转收集器头部并缓慢退出。收集抽取的粘液，并用3ml采样液涮洗收集器1次 4、咽漱液：用10ml不含抗菌素的采样液漱口，漱口时让患者头部微后仰，发“噢声”，让洗液在咽部转动。然后，将咽漱液收集于50ml无菌的螺口塑料管中。无条件可用平皿或烧杯收集咽漱液并转入10ml螺口采样管中。 　注：取鼻洗液和漱口液时，需预先了解患者是否对抗菌素有过敏史，如有洗液和含漱液中不应含有抗菌素。 5、深咳痰液：要求病人深咳后，将咳出的痰液收集于50ml含3ml采样液的螺口塑料管中。 6、呼吸道灌洗液：将收集器头部从鼻口处插入气管（约30cm）深处，注入5ml生理盐水，接通负压，旋转收集器头部并缓慢退出。收集抽取的粘液，并用采集液涮洗收集器1次。 7、胸水：在B超定位下进行胸腔穿刺，抽取胸水5ml，置于无菌的塑料口管中。 8、肺组织活检标本：在超声或X线定位下，经皮穿刺取肺组织活检标本，置于含3ml采样液的塑料螺口管中。 9、尸检标本：每一采部位分别使用不同消毒器械，以防交叉污染；每种组织应多部位取材，各部位应取20—50g，淋巴结取2个。 10、粪便标本：采取5-10g粪便置于含5-10ml采样液无菌螺口管中，严格密封。 11、血清标本：用真空负压血管采集血液标本5ml，室温静止30分钟，1500-2000rpm离心10分钟，收集血清于无菌螺口塑料管中。 12、淤血点：选病人皮肤上的新鲜淤斑或淤血点，消毒后用针头挑破，挤出组织液，用无菌棉签蘸取先接种含双抗的葡萄糖增菌肉汤管中增菌8~12小时后分离培养或直接接种EPV平板，再涂片染色直接镜检。涂片也可做免疫荧光检查。 13、尿液标本：取病人急性期尿液5ml加20ml无水乙醇，置4 ℃2小时，离心（3000转/分钟，15分钟），弃上清，收集沉淀部分加0.25ml磷酸盐缓冲液将其溶解，同前离心，吸取上清液检测脑膜炎奈瑟氏菌（Nm）群特异抗原 麻疹、风疹：取病人急性期尿液5--10ml于无菌螺口塑料管中。 14、脑脊液 (CSF)：如果怀疑为脑膜炎，CSF是用于分离和鉴定病原体最好的标本。取患者CSF2-3ml ，注入无菌的试管内。3000转/分，离心20分钟，用无菌吸管取沉淀物直接接种到10%羊血巧克力色琼脂平皿上做细菌培养。CSF沉渣还可涂片，作革兰氏染色镜检。CSF离心后的上清液可置-20℃，供做血清学检查脑膜炎奈瑟氏菌（Nm）群特异性抗原。 五、采样液 普通肉汤 ph7.4～7.6的Hank’s 3、 5%水解乳蛋白液。为防止细菌和真菌生长，在采样液中需加入抗菌素，以往抗菌素多用青、链霉素（每毫升含青 霉素1000单位.链霉素100微克），近来发现不少种类细菌对它们具有耐药性，故近来多用庆大霉素（其终浓度为每ml采样液中加入0.1m1的l0mg／ml） 水解乳蛋白