HE(苏木素-伊红)染色试剂盒操作说明及注意事项.pdf

HE （苏木素-伊红）染色试剂盒操作说明及注意事项 货号：G1120 规格：3×10ml/3×100ml 保存：常温保存，复检期至少 1年。 产品内容 G1120-10 G1120-100 苏木素染液 10ml 100ml 分化液 10ml 100ml 伊红染液 10ml 100ml 注意：环境温度时，分化液可能会结晶析出，将分化液37℃水浴融化后即可，不影响使用。 产品说明： 苏木精-伊红染色法 (Hematoxylin-Eosin staining )，简称HE染色法 ，是病理学常 规制片中最基本的染色方法。苏木精染液为碱性 ，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核 糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。 染色过程需要优化，着色情况与组织或细胞的种类有关，也随其生活周期及病理变化而 改变。例如，很多细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱，当其衰老时或发生退行 性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时，伊红着色由浅变深。 本产品所包含试剂均为工作液，可直接使用。 操作说明 （以下步骤仅供参考）： （一）石蜡组织切片染色。 1．取材组织块，经固定后，常规石蜡包埋，切片。 2．石蜡切片脱蜡水化： ①二甲苯 （I）中脱蜡5min。 ②换用新鲜的二甲苯 （Ⅱ），再脱蜡5min。 ③无水乙醇5 min。 ④95%乙醇2min。 ⑤80％乙醇2min ⑥70%乙醇2min。 ⑦蒸馏水2min。 3．苏木素染液染色5-20min(具体时间根据染色结果和实验要求调整)，自来水冲洗。 4．分化液分化30s。 5．自来水浸泡15min或温水 （约50℃）5min。 6．置伊红染液几秒-2min(具体时间根据染色结果和实验要求调整)，自来水冲洗。 7．自来水浸泡5min。 8．脱水，透明，封片： ①95％乙醇 （I）1min ②95％乙醇 （Ⅱ）1min ③100％乙醇 （I）1min ④100％乙醇 （Ⅱ）1min ⑤二甲苯石炭酸 （3：1）1min ⑥二甲苯 （I）1min ⑦二甲苯 （Ⅱ）1min ⑧中性树胶封固，镜下观察。 （二）冰冻切片 冰冻切片不用脱蜡，可固定后直接染色，其方法与石蜡切片相同。 注意事项： 1、切片脱蜡应尽量干净。 2、系列乙醇应经常更换新液。 3、第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。 4、染色过程推荐浅染，通常只需能够分辨细胞核即可，颜色过深有可能影响细胞质颜色。 5、冷冻切片染色时间尽量要短。 6、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。