发酵培养基的制备和实罐灭菌.ppt

实验内容 一、发酵培养基的制备 二、机械搅拌罐实罐灭菌工艺 一、面包酵母液体深层通风发酵实验 1、实验目的 要求学生掌握通风发酵的基本原理及过程，掌握上罐操作技术，掌握流加补料控制技术。 （1）发酵罐及管路、空气过滤器灭菌操作及发酵罐系统管路的熟悉 （2）实罐灭菌—培养基灭菌实验 2、实验原理 2.1 培养基组分的种类和作用：人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成各种代谢产物的营养物质。主要包括：碳源、氮源、无机盐、生长因子、前体 2.2 实罐灭菌原理 3、实验仪器、设备和材料 10 L搅拌式发酵罐（pH仪，培养液及酸碱液流加装置，蠕动泵），1台，淀粉水解糖液、尿素等原料，灭菌锅。 斜面培养基配制与灭菌，接种，培养 所需仪器物品：灭菌锅、试管、棉塞、培养基原料 300毫升种子液、500ml三角瓶三只、装液100ml、培养基、培养摇瓶、纱布。 发酵培养基制备，灭菌 面包酵母菌的培养条件及培养基组成： 酵母斜面培养基：10o麦芽汁固体斜面，pH5.0 酵母摇瓶培养基：10o麦芽汁，pH5.0或葡萄糖10%，玉米浆1%，尿素0.2%，pH5.0 酵母分批发酵培养基：玉米淀粉经液化、糖化，折合葡萄糖浓度为10%、玉米浆1%，尿素0.2%，pH5.5。 5、实验报告内容和数据处理 实验设计原理；发酵系统的结构与操作方法。 附：发酵系统介绍 1 技术指标 1.1 概述 具有温度、转速、氧气流量、空气流量、pH 、DO 、补料、消泡显示及控制功能，并配有机械消泡浆。 1.2 指标 1.2.1 温度：自动控制范围：自来水温+5℃～ 50℃﹙±0.2 ℃ ﹚显示范围：0 ～150 ℃ 1.2.2 搅拌转速：调速范围50 ～1000±5rpm 1.2.3 空气流量：显示控制范围0 ～ 10L/min 1.2.4 pH显示控制：2 ～12pH±0.05﹙酸碱双向﹚ 1.2.5 溶解氧：0 ～150±2℅ 1.2.6 补料、消泡蠕动泵各一台 1.2.7 罐体总容积10 L，设计压力2.0 kg/c㎡、最高工作压力2.0 kg/c㎡，设计工作温度131 ℃ 1.2.8 灭菌方法：手动控制蒸汽消毒灭菌 1.2.9 功率：主机：3kw, 单相220v 1.2.10 气源：2 ～4 kg/c㎡ 1.2.11 蒸汽： 2 ～4 kg/c㎡ 2 管路说明 该流程图中空气管路阀门的标号为“AXX”,蒸汽管路阀门的标号为“SXX”，冷却水管路阀门标号为“WXX”，冷凝水管路阀门标号为“VXX”，电磁阀标号为“CXX”，物料管路阀门标号为“PXX”,冷冻水管路标号为“CWX”，其它气体管路标号为“NXX”。 2.1 空气及其净化 来自空气压缩机的压缩空气经净化器（外接减压稳定器、除水、除尘、空气予过滤器）进入发酵罐空气总管，空气流量计针阀A01、阀A02、单向阀、空气过滤器，阀A03到达反应器内，尾气经阀VT1排出，本管路具有计量，净化作用。 注：空气流量显示的流量是以过滤器前的压力下的流量，不是标准状态下的流量。 2.2蒸汽 2.2.1 蒸汽进夹套 蒸汽经阀S01进入夹套（上进），经阀V01排出冷凝水。蒸汽对培养基预热。 2.2.2 蒸气进反应器 蒸汽经阀S02、单向阀、空气过滤器、阀A03进入罐内，由排气口控制阀VT1排出。蒸汽对过滤器及空气管线消毒。 2.2.3 蒸汽进取样阀及放料阀 蒸汽经阀S03进入取样阀，出阀P02排出冷凝水。 2.3 自来水 2.3.1 自来水进夹套 当电磁阀C01打开时，自来水经自动注水阀、阀W01进入反应器夹套（下进），由夹套上口、阀W02、加热器、电磁阀C01排出； 当电磁阀C01关闭时，夹套水经W02进入电加热器、循环泵、单向阀进入夹套（下口），通过夹套水的循环，将加热器的热能带入夹套，通过夹套的换热加热发酵液。 特别提示：温度自动前必须对夹套注水。 2.3.2 自来水进排气冷凝器 自来水经阀W03进入排气 冷凝器，对发酵尾气进行冷却 尽可能减少培养基的水分蒸发。 3 实罐灭菌操作 3.1 准备 3.1.1 盖紧罐盖上各种罐盖，旋紧罐盖上压紧螺栓。 3.1.2 标定pH、DO电极，将电极插入罐体侧面的传感器口并及时地锁紧螺母，确保安装妥当防止高压下传感器弹出伤人。 3.1.3 关紧发酵罐底阀P01，倒入培养基，调整PH值，旋紧接种口 注：氯离子对不锈钢会带来不可逆转的破坏 ，因此应避免用盐酸溶液调节PH，如工艺上无法避免用盐酸，应控制盐酸浓度不大于5 ℅且在添加过程中不得直接接触不锈钢。