荠菜多糖提取液除蛋白工艺研究.pdf

第41卷 第 11期 化 工 技 术 与 开 发 Vo1．41 No．11 2012年 11月 TechnologyDevelopmentofChemicalIndustry NOV．2012 荠菜多糖提取液的除蛋 白工艺研究 欧 文，黄榕彬，曹 轩，贺冬秀，陈临溪，唐国涛 (南华大学药物药理研究所 ，湖南 衡阳421001) 摘 要：筛选了荠菜多糖提取液除蛋白的最佳工艺。以蛋白去除率和多糖损失率为指标，比较Sevag~、三氯乙 酸法、木瓜蛋白酶法除蛋白的效果，并用正交试验优选出最佳工艺。结果表明，木瓜蛋白酶法除蛋白效果最佳，以 酶用量2．O％，酶解pH5．0，酶解时间1．5h，酶解温度60~C为最佳除蛋白工艺。木瓜蛋白酶法除蛋白方法效果较好，为 荠菜多糖制备工艺的进一步研究提供了参考。 关键词：荠菜多糖；除蛋白；酶法；正交试验 中图分类号：O629．73 文献标识码：A 文章编号：1671-9905(2012)11-0007．04 荠菜(Capsellabursa—pastoris)为十字花科 1—2 2 方法与结果 年生草木植物，全草可人药，是药食同源植物。荠菜 2．1 多糖提取方法 多糖是荠菜中的主要活性成分之一。近年来，多糖 称取荠菜药材粉末 60g，加4倍量95％乙醇回 所具有的各种生理功能逐渐为人们所重视 ，如降低 流提取脱脂，药渣加600mL蒸馏水超声 lh，过滤，离 血糖浓度、抗肿瘤、抗疲劳及抗衰老等。从天然动植 心，取上清液，得粗多糖提取液。 物提取的多糖，往往含有大量蛋白质，蛋白质的存在 不仅可能影响其结构和生物活性，且可能导致药理 2．2 多糖含量测定方法 作用下降 [】l，因此，脱蛋白是一个重要的环节。常 采用苯酚一硫酸法，准确称取葡萄糖 20．Omg，置 见的脱蛋 白方法有Sevag法、三氯乙酸法 、木瓜蛋 白 烧杯中，加水溶解转至 lOOmL容量瓶并稀释至刻度 酶法等p】，不同的除蛋白方法适用于不同来源的多 作为母液，吸取0．1mL、0．2mL、0．3mL、0．4mL、0．5mL、 糖，目前尚未见到去除荠菜多糖中蛋白质方法的研 0．6mL葡萄糖母液置不同的具塞试管中用蒸馏水补 究报道。本试验通过对 以上 3种方法的比较，对荠 充至2．0mL，加入6％苯酚 1．0mL及浓硫酸5．0mL，摇 菜多糖提取液中最佳的蛋白质去除方法进行了初步 匀冷却，室温放置 20min，490nm测吸光度，以2．0mL 探讨，以清洁、条件温和、操作简单的方法为多糖类 蒸馏水按同样操作为空 白对照，以葡萄糖质量浓度 药品和保健产品的开发提供了有利条件 。 为横坐标x，吸光度为纵坐标 y，进行回归处理，建立 回归标准 曲线方程为 y_1．183X-0．003(r=0．9994)。 1材料与仪器 表明葡萄糖质量浓度在 1．0～6．0mg·mL-。的范围内， 荠菜采摘于湖南省衡阳市新华开发区，经过南 _x与y的线性关系 良好。 华大学严奉祥教授鉴定。荠菜阴干，粉碎，过0．42mm 2．3 蛋白含量测定方法 筛，备用。 蛋 白质含量采用考马斯亮蓝法测定 5【】。取 6支 日本岛津uV一2450紫外分析仪 、BSZZ4S型电 具塞 试 管，分 别加 入0．1mL，0．2mL，0．3mL，0．4mL， 子分析天平、80