药学毕业论文--维A酸对大鼠胃癌前病变增殖细胞核抗原和端粒酶活性的影响.doc

维A酸对大鼠胃癌前病变增殖细胞核抗原和端粒酶活性的影响 作者：杨赤兵，谭大琦，李卫星，姜楠 【摘要】 目的 观察维A酸（RA）对大鼠胃癌前病变增殖细胞核抗原（PCNA，用增殖指数 PI表示） 和端粒酶活性（用hTERT表示）的影响。方法 采用甲硝基亚硝基胍（MNNG）、0.03%雷尼替丁、56 ℃15%盐水、0.85%脱氧胆酸钠、40%乙醇、饥饱失常等多种因素制作大鼠胃癌前病变模型,免疫组化方法检测正常组、自然恢复组、RA 20 mg/kg和RA 40 mg/kg组大鼠胃黏膜组织中 PI 和 hTERT 蛋白表达情况。结果 正常组和RA 40 mg/kg组PI、hTERT 蛋白阳性率均较自然恢复组低，差异有显著性（Plt;0.01或Plt;0.05）。结论 维A酸可能是通过抑制端粒酶及细胞增殖活性，发挥逆转胃癌前病变的作用。 【关键词】 维A酸 ；癌前病变； 增殖细胞核抗原；端粒酶 　　Abstract:Objective To observe the effect of retinoic acid（RA） on proliferating cell nuclear antigen (PCNA, represented with proliferating index, PI) and telomerase activity (represented with human telomerase reverse transcriptase，hTERT) in rats with gastric precancerous lesion． Methods The model was established by MNNG together with other factors including 15% 56 ℃ brine，sodium deoxycholate， 40% alcohol stimulus， 0.03% ranitidine， undue hunger，and overeating． PCNA(converted to PI) and hTERT was detected by immunohistochemical method， in normal group， spontaneous recovery group，and RA（20 mg/kg and 40 mg/kg） group．Results PI and hTERT of normal group and RA 40mg/kg groups were lower detected than spontaneous recovery group and was significantly different (Plt;0.01 or Plt;0.05)． Conclusion RA makes GPL reversed in rates by inhibiting activity of telomerase and cell proliferating． 　　Key words: retinoic acid； precancerous lesions； proliferating cell nuclear antigen；telomerase 　　利用某些化学物质诱导肿瘤细胞分化为正常细胞或近似正常细胞，已成为抗肿瘤药物研究的热点，维A酸是肿瘤分化诱导剂的代表之一。维A酸对多种化学致癌过程和诱癌作用有抑制作用，具有逆转胃癌前病变大鼠的肠化生和不典型增生作用，对急性早幼白血病M 型的疗效,已被证实和公认［1，2］。为进一步探讨其作用机理，本文观察维A酸对大鼠胃癌前病变增殖细胞核抗原和端粒酶活性的影响，报告如下。 　　1 材料 　　1.1 实验动物SPF级,雄性 Wistar大鼠,6周龄, 体质量100～120 g,由湖北省实验动物研究中心提供 ,生产许可证号：SCXK（鄂）2003-0005。 　　1.2 主要药品及试剂维A酸( RA) ，上海第六制药厂；甲硝基亚硝基胍（MNNG）为 Fluka 公司产品；脱氧胆酸钠 ，北京双旋微生物培养基制品厂；雷尼替丁， 杭州赛诺菲圣德拉堡民生制药有限公司；无水乙醇 ，上海振新兴化工一厂；氯化钠 ，天津化学试剂三厂；即用型PCNA 单抗、即用型端粒酶催化活性亚单位（hTERT）多抗试剂盒、SPDAB 即用型显色试剂盒均购自北京中山生物技术公司。 　　1.3 主要仪器CUT 5062轮转切片机，德国SLEE公司；BX 40系统显微镜，日本OLYMPUS公司；HPIAS1000 型显微摄像全自动图像分析仪，同济千屏影像工程公司。 　　2 方法 　　2.1 造模及给药方法按综合法复制模型 ［ 3］。大鼠50只，随机