环境卫生学监测及标本采集方法.ppt

临床微生物标本采集和运送中的常见问题 采样方法不符合规范 医护人员操作不到位：表现为 1、静脉导管管端培养时，导管拔出血管前，周围皮肤未经 75 %酒精消毒，正确培养方法是剪一段导管管端直接投入无菌试管内送检。 2、采集手术切口前，没有用无菌生理盐水擦洗伤口，造成皮肤杂菌污染，导致培养结果假阳性。采样的无菌棉拭子未经无菌生理盐水湿润，导致标本干燥，无法检测。 3、采血培养标本时皮肤消毒时间偏短，穿刺针入培养瓶前未过火焰；针头入无菌试管管口前及管塞打开、塞上前未经火焰烧灼。 临床微生物标本采集和运送中的常见问题 标本运送不及时　　标本采集后，由护工运送至实验室。必须确保标本中的原始菌在采集、运送过程中不死亡也不繁殖。但由于护工要兼顾多个科室的工作，不是每次都能随叫随到，故有时只能任标本搁置多时后再将其送往实验室，也有的采样者不了解此类标本须及时送检，而未及时送，致使少数痰液和伤口拭子标本送到实验室时已干燥，而其他尿培养、脑脊液培养一类标本因送检不及时而影响检测结果，而化验单上未注明采样时间，故实验室没法推测这类标本运送是否及时。 临床微生物标本采集和运送中的常见问题 原因分析 1、知识缺乏： 采样者对如何准确采样和运送的知识不了解或了解甚少。2、采样目的不明确：少数人为完成工作任务而采样，草率了事，只讲速度、数量，而不讲质量。表现在让患者自行留尿、痰前，对患者该讲明的注意事项不讲，该指导的不指导，将该操作的步骤省略。 临床微生物标本采集和运送中的常见问题 原因分析 3、备物不规范：有的科室不备酒精灯和火柴。细菌室对无菌试管未注明灭菌有效期。4、现有工作程序存在缺陷： 细菌培养标本的采集是临时医嘱，按规定临时医嘱应及时执行。但如尿、痰、分泌物一类标本最好是在下一个抗生素剂量给药以前留取，可提高检查阳性率，所以，它由后半夜护士在清晨采样，或者次日白班来采样较合适。 对策 1、感染管理科专职人员加强微生物标本采集、运送规范知识培训，定期考核，使医务人员重视采集和送检规范，将标本污染的可能性减少到最小程度。 2、各科室备齐酒精灯、火柴等采样器材，护士长加强督促，强调环节的落实，医务人员也应具备慎独精神，遵守操作规程。 3、患者自己留取痰液、中段尿、粪便标本前，医护人员不但要做好详细的指导，而且应督促其按规定时间完成。 4、细菌室建立不合格标本退后回登记本，把唾液当痰液送来的、容器选择不合格的、干燥的标本全部予以退回，要求重新采集。 5、送检时间是影响实验室质量的一个重要因素，科室应督促护工及时运送，防止标本中的原始菌死亡或繁殖。。 临床微生物标本采集和运送中的常见问题 综上所述，医护人员必须严格遵守微生物学标本的采集运送规范，提高标本送检合格率，提高细菌培养和药敏试验的准确性，确保实验室资料的可信度，真正体现做细菌培养的目的，为临床合理使用抗生素提供依据。 常用消毒剂中和剂及其浓度表 消毒剂 中和剂及其浓度 甲醛 亚硫酸钠（0.1%～0.5%） 氨水 双甲酮（0.1%～1.0%）+吗啉（0.6%～1.0%） 戊二醛 甘氨酸（1.0%）；赖氨酸 亚硫酸钠（0.1%～0.5%） 双甲酮（0.1%～1.0%）+吗啉（0.6%～1.0%） 过氧乙酸 硫代硫酸钠（0.1%～0.5%） 含氯消毒剂类 硫代硫酸钠（0.1%～1.0%） 季铵盐类 吐温－80（0.5%～3.0%） 卵磷脂（0.3%） 硫代硫酸钠（0.1%～0.5%） 亚硫酸钠（0.1%～0.5%） 碘（溴）制剂 亚硫酸钠（0.1%～0.5%）；卵磷脂（0.1%～0.3%） 硫代硫酸钠（0.1%）；半胱氨脂（0.1%） 酚类 吐温－80（1%～10%）；卵磷脂（0.1%～0.3%） 氯已定 卵磷脂（1.0%～2.0%） 汞制剂 硫代硫酸钠；亚硫酸钠；半胱氨脂（0.1%） 醇类 吐温－80 酸类 碱类 碱类 酸类 用无菌吸管吸取中和采样液0.2ml，转种于营养琼脂平板中，用L棒涂抹于普通琼脂平板，置36 ℃温箱培养48小时观察结果。 菌落数/ml＝ 平均菌落数×稀释倍数 0.2 结果判断 使用中消毒液细菌菌落总数应≤100cfu/ml，不得检出致病微生物。 无菌器材保存液必须无菌生长。 6、压力蒸汽灭菌效果监测 指示菌：嗜热脂肪杆菌芽胞（产品应根据厂家说明书在有效期内使用） 方法：灭菌完毕，取出自含式生物指示物，至少冷却10分钟以上，将安瓿折断或挤破，让管内溴甲酚紫蛋白胨水培养基与嗜热脂肪杆菌芽胞菌片融为一体，同时将一未经灭菌的生物指示物一同培养，56 ℃ 48小时后进行灭菌效果判定。 效果判定 阳性对照 阴性对照 试验管 结果 黄 紫 紫 灭菌认可 黄