真菌孢子的产生.ppt

实验五 真菌孢子的产生、萌发和计数 The produce, germination and calculation of fungi spores 一个重232g 的大秃马勃的担子果内可产生7×1012个担孢子，若每个孢子都能萌发并产生一个与母体相当的担子果，那么合起来将是地球的800倍。 重要意义： 真菌孢子的形态是真菌鉴定的主要依据。 孢子萌发实验是杀菌剂药效测定的主要方法。 研究病原真菌的生活史、病害循环以及病害的发生和流行条件，都涉及孢子的产生和萌发问题。 一、真菌孢子产生的条件 真菌孢子的产生往往受到很多因子的制约 在自然条件下，许多子囊菌在寄生生活时产生无性孢子（即分生孢子），而当寄主组织死亡以后才形成有性孢子（即子囊孢子）。 真菌营养生长和产生孢子繁殖要求的条件不同，但营养生长积累了为产生孢子所需要的养分。 真菌产生孢子是由它的遗传特性决定的，同时受环境条件的影响很大。 一般来说。产生孢子的条件要比生长的条件严格，产生有性孢子的条件又比产生无性孢子的条件严格。 1900年，Klebabn，H 在研究了许多真菌的生长和生殖（产生无性和有性孢子）以后，得到以下结论： （1）生长和生殖要求不同的条件，低等生物主要是由环境决定它们生长或生殖； （2）低等生物在适宜于它生长的条件下，不发生生殖作用。有利于生殖的条件，往往不利于生长； （3）生长条件没有生殖条件这样严格，在不能生殖的条件下，它们仍能继续生长； （4）生殖以前必需有生长，生长为生殖创造条件。 二、促使真菌孢子产生的条件 培养基的种类和成分 培养基与孢子产生的关系最大，采用不同的培养基或者改变它们的成分，是促使孢子产生最主要的途径。 （1）减低养分的浓度 培养基中营养物质太多或者浓度过高，菌丝体的生长很好，有时很少产生孢子，其中一碳源的影响最大，其次是氮源。 一般来说，适当降低培养基中养分的浓度，或者将真菌在养分很高的培养基中培养以后，再移植到养分较低的培养基中，都能促进孢子的产生。 （2）改变碳源、氮源和它们的比例 适合于菌丝生长的碳源和氮源，不一定有利于孢子的产生。 复杂的碳水化合物，对于菌丝的生长不一定太好，但有利于孢子的产生。 对于孢子的产生，蔗糖一般比葡萄糖好，用蔗糖、乳糖和淀粉代替葡萄糖，有时可以促进孢子的产生。 （3）选用不同的培养基 不同的培养基，对孢子的产生影响不同。 利用植物组织或它们的煎汁作培养基，可以促进有些真菌孢子的产生。 （4）微量元素和维生素等 如用化学纯的药品配成的组合培养基，加微量元素和维生素等，可以促进孢子的产生。 2. 培养基的理化性质 （1）固体和液体培养基 许多真菌再固体或半固体培养基上比在液体培养基上容易产生孢子。 （2）氢离子浓度 改变培养基的pH值，能够影响孢子的产生。在一定限度内，增加酸度可以促使某些真菌产生孢子。 （3）灭菌方法 热力灭菌改变了培养基的成分，改用过滤灭菌或化学灭菌法，有时可以使真菌产生孢子。 3. 培养条件 （1）温度 适宜于真菌产生孢子的温度范围，比适于它生长的范围窄。在高温或低温下培养，或高温低温交迭培养，有时可促进孢子的产生。 （2）光照 许多真菌要有一定的光照才能产生孢子。 光波长短对孢子的产生有不同的影响。一般以紫外线、近紫外线和蓝光的作用最明显，红光也可刺激少数真菌产生孢子。 光照时间对孢子产生也有影响。 实验中要注意培养皿或其他器皿的透光性。一般4mm的窗玻璃，低于300－350nm的光波很难透过；2mm的硬质培养皿，波长低于260－270nm的光就不能透过；塑料培养皿则波长300nm以下的就不能透过；透明的石英玻璃，波长低于150nm的都不能透过。 4. 培养方法 （1）通气和振荡 许多真菌接种在适当的培养液中，用通气、搅拌或振荡培养的方法，可以促进生长和孢子的产生。 （2）移植方法 繁殖菌种时，如挑取孢子而不是菌丝体移植，有时可以促使产生孢子的产生。 （3）培养时间 菌种在同一培养基上生长时期的培养，或者使菌种逐渐干燥，也能促使某些真菌的产生。 （4）划碎菌落 将琼胶平板表面的菌落划碎，使菌丝体受到损伤，有时可以促使孢子的产生。 三、孢子萌发的条件 真菌孢子的萌发，受内在因子和环境条件的影响。 内在因子主要是孢子的成熟度、寿命长短、休眠期限和生机的强弱等。 环境因子主要是温度、湿度、氢离子浓度、养料的种类和浓度、空气、日光以及其他光线的照射等。 此外，孢子形成时的条件，也影响孢子的寿命和它的萌发。 温度 温度是最重要的条件，影响萌发的快慢、萌发的百分率和芽管的生长。 2. 湿度 真菌的孢子一般要在水滴中才能萌发，有的在湿度很高的条件下虽没有水滴也能萌发。 水分的多少有时还决定孢子萌发的形式。 具有休眠期的孢子，有时经过干湿处理可以促使它们萌发