- 1、本文档共5页,可阅读全部内容。
- 2、有哪些信誉好的足球投注网站(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
肺成纤维细胞分离
【摘要】 目的: 建立一套可靠的鼠肺细胞分离、纯化和培养技术,用于体外研究间质性肺病的发病机制及治疗方法。方法: 采用胰酶消化出生后2 d SD大鼠肺组织块及SD大鼠肺泡灌洗液, 经差时贴壁法, 分离、纯化红皮鼠肺成纤维细胞(lung fibroblast, LF)和SD大鼠肺泡巨噬细胞(pulmonary alveolar macrophage,AM), 并进行原代培养。用波形蛋白(Vimentin)、 CD14细胞免疫荧光染色、蛋白质印迹和电镜对所分离的细胞进行鉴定。结果: 所得细胞产量大、纯度高。细胞免疫荧光染色LF细胞波形蛋白染色阳性而CD14染色阴性;AM细胞则相反。扫描电镜观察可见肺成纤维细胞有微绒毛,细胞间连接成网状,蛋白质印迹结果显示波形蛋白表达。结论: 该方法是一种可靠的红皮鼠肺成纤维细胞及大鼠肺巨噬细胞的分离纯化培养技术, 可用于间质性肺病(interstitial lung disease, ILD)的发病机制及治疗方法的体外研究。
【关键词】 大鼠; 肺成纤维细胞; 巨噬细胞; 原代细胞培养
[基金项目] 江苏省高校自然科学研究计划项目(03KJD320076);镇江市社会发展科技计划项目(SH2004043)
Isolation and purification and primary culture of lung cells from rats
YAN Yu-lan, LIU Yang, BU Xue-feng, ZHANG Zhi-jian, ZHENG Jin-xu
(Department of Respiratory Medicine, the Affiliated People′s Hospital of Jiangsu University, Zhenjiang Jiangsu 212002; School of Medicine, Jiangsu University, Zhenjiang Jiangsu 212013,China)
[Abstract] Objective: To develope a reliable method for isolation, purification and primary culture of lung fibroblast(LF) and pulmonary alveolar macrophage(AM) from rat for studies on pathogenesis and treatment of interstitial lung disease in vitro. Methods: The lung tissue of 2 days old immature rats was digested with trypsin.LFs and AMs were isolated and purified, then cultured. The nature of the cultures was identified by CD14 staining, vimentin staining, electron micrography and Western blot. Results: Excellent yields of highly purified, culturable AMs and LFs could be obtained from adult rats and 2 day babyish rat lungs,respectively. The expression of CD14 in AMs was positive and that of vimentin negative by immunofluorescence chemistry. Those, however, in LFs were just opposite. Ramified stracture between purified LFs were observed by ultrastructural examination under electron micrography.Vimentin in purified LFs was revealed by Western blot. Conclusion: This technique might be a reliable method for isolation and purification and primary culture of pulmonary alveolar macrophages and lung fib
您可能关注的文档
最近下载
- 第二单元 项目1 《 获取长城研学路线-互联网信息有哪些信誉好的足球投注网站》教学设计 2024—2025学年安徽版(2024)初中信息技术七年级上册.docx VIP
- 江苏省2024普通高中学业水平合格性考试英语真题卷 .pdf
- 第二单元+项目1+《+获取长城研学路线-互联网信息有哪些信誉好的足球投注网站》课件+2024—2025学年安徽版(2024)初中信息技术七年级上册+.pptx VIP
- 浙江交投高速公路建设管理有限公司部分中层管理岗位公开竞聘【综合基础知识500题】高频考点模拟试题及参考答案解析.docx
- 天然气对井内压力的影响(五)课件.pptx VIP
- 妇产科医疗质控总结.pptx VIP
- 企业内部控制指引.doc
- 山东大学齐鲁医院诊断证明.docx VIP
- 心胸外科出科.pptx VIP
- 2024贵州遵义市面向优秀村(社区)干部专项招聘乡镇(街道)事业单位工作人员61人笔试备考题库及答案解析.docx VIP
文档评论(0)