【备战】生物专题辅导与训练配套(江苏专用)酶的应用和生物技术在其他方面的应用.ppt

①第1组：_________________________________________； ②第2组：_________________________________________。 （3）PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为_________________ ___________________________________。 （4）用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图（1 kb即1 000个碱基对），请画出质粒上EcoRⅤ、MboⅠ的切割位点。 【规范答题】（1）生物术语规范:碱基互补配对、DNA聚合酶、脱氧核苷酸、双链DNA。 （2）解答规范:第（1）小题要结合DNA的半保留复制进行解答。第（2）小题涉及到引物的设计和作用，要明确引物的作用是与模板链（DNA单链）的3′端的部分碱基发生碱基互补配对，之后单个脱氧核苷酸才能与模板链后面的碱基连续进行碱基配对；设计引物时，要注意引物之间、单个引物内不能发生碱基互补配对，否则会影响引物与模板链上的碱基互补配对，从而不能发挥引物的作用。 【解析】解答本题首先要明确两点:①PCR一般要经历三十多次循环，每次循环都包括变性、复性（退火）、延伸三步。②两个引物之间的固定长度的DNA序列呈指数扩增。然后结合问题作答。 （1）①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的 DNA片段所占的比例为15/16。②在第三轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。 （2）某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理，原因是：①引物Ⅰ和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效。②引物Ⅰ′自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效。 （3）DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上。 （4）由图可知，单独用限制酶EcoRⅤ切割质粒，形成一个片段，说明在质粒上只有一个EcoRⅤ切割位点；当用限制酶MboⅠ单独切割质粒时，形成两个片段，说明在质粒上有两个MboⅠ切割位点；当两者联合切割同一质粒时，形成三个片段，说明两种限制酶的切割位点不同，且EcoRⅤ酶切割位点距MboⅠ的两个酶切位点是5.5 kb 和6 kb。 满分答案:（1）①15/16 ②三 （2）①引物Ⅰ和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效 ②引物Ⅰ′自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效 （3）DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上 （4）见图 第2讲 酶的应用和生物技术 在其他方面的应用 一、解读酶的应用 1.酶在食品制造和洗涤等方面的应用 （1）纤维素酶与果胶酶： （2）加酶洗衣粉： ①概念：指含有酶制剂的洗衣粉，目前常用的酶制剂有蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶四类。 ②洗涤原理： 2.制备和应用固定化酶、固定化细胞 （1）直接使用酶、固定化酶和固定化细胞的差异： （2）固定化酵母细胞的制备： 酵母细胞的活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞。 说明： ①CaCl2溶液的作用是增强凝胶珠的强度； ②配制海藻酸钠溶液时要小火或间断加热，浓度要适宜，保证凝胶珠成形且能固定； ③海藻酸钠溶液要冷却后再与酵母细胞混合，否则会杀死酵母细胞。 【特别提醒】 （1）纤维素酶是一种复合酶，果胶酶是单一酶。 （2）果胶酶可以提高果汁的出汁率，还可以提高果汁的澄清度。 （3）蛋白质类丝绸物不能用蛋白酶洗衣粉洗涤。 （4）海藻酸钠溶液的配制是固定化酵母细胞的关键，因为如果海藻酸钠溶液浓度过高，将很难形成凝胶珠;如果浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数量少，都会影响实验效果。 二、植物的组织培养 1.影响植物组织培养的因素 （1）内因：材料的种类、年龄、保存时间长短等。 2.植物组织培养与花药培养技术的比较 三、DNA和蛋白质技术 1.PCR扩增技术 （1）原理：DNA复制。 （2）条件：模板、原料、酶、ATP。 （3）场所：体外PCR扩增仪。 （4）方向：DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，而只能从3′端延伸DNA链，因此，DNA复制需要引物。当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的3′端开始延伸DNA链。因此，DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸。 （5）过程： ①变性：当温度上升到90 ℃以上时，双链DNA解聚为单链，如下图： ②复性：温度下降到50 ℃左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合，如下图： ③延伸：温度上升到72 ℃左右，溶液中的四种脱氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链，如下图： 2.血红蛋白的提取和分离 （