071气相色谱操作规程.doc

标 准 操 作 程 序 Standard Operating Procedure 题目： 气相色谱操作规程 共10页 第1 页 部门：QC 起草： 起草日期： 审核： 审核日期： 批准： 批准日期： 编号：QOS-071 改版编号： 生效日期： 颁发部门： GMP办 分发部门：QC、QA 1、目的：建立气相色谱操作规程，规范气相色谱法操作。 2、范围：本公司产品、原料、辅料、中间体的检验。 3、责任人：QC检验员。 4、正文： 4.1简述。 气相色谱仪（以下简称仪器）是以气相色谱法原理为基础而设计的仪器。填充柱式气相色谱仪是将固定液涂布于惰性载体上，装入玻璃或不锈钢材料制成的色谱柱内。毛细管柱气相色谱仪多用将固定液交联或键合于空管弹性石英毛细管内壁，称作融熔石英空心毛细管柱（FSOT）。流动相用气体，称为载气。仪器由气路系统、进样系统、柱分离系统、检测系统、上述的温度控制系统和数据采集系统所组成。气相色谱法分析固态及液态样品时，是在加温状态下使样品处于气态，在载体上的固定液和载气间进行分配分离。 4.2仪器与器具：气相色谱仪、微量进样器、所需的气源发生器。 4.2.1气路系统。 4.2.1.1气源载气有氮、氦、氢等。常用氮作载气。氮纯度最好使用99.99％高纯氮。但填充柱以氢火焰离子化检测器亦可用99．9％纯氮，氮多用6m3高压钢瓶装，按照高压容器安全操作规程操作。当气瓶气压下降到20kg/cm2时，应停止使用。由于氢有分子量小、热导系数大、粘度小等特点，因此在缺乏氦的情况下，常采用作热导检测器载气，在火焰离子化检测器中它是必用的燃气。为了提高载气的线速度，缩短分析时间，用毛细管柱分析某些样品时，可采用氢作载气、氮作补气、空气助燃的办法。氢的来源目前除了氢高压钢瓶外，还可采用氢气发生器。氢易燃、易爆。使用时应特别注意安全，特别要注意气路的各联接部分的 题目： 气相色谱操作规程 共10页 第2 页 漏气检查。空气是氢焰检测器助燃气体，可用小型无油型空气压缩机提供气源。 4.2.1.2气路连接、气流指示和调节在安装气瓶减压阀时，应先将瓶口联结处的灰尘擦干净，将瓶口向外，旋阀门开关放气数次，吹除灰尘，将减压阀用扳手拧紧，再用联接管将减压阀出日联至气相色谱仪。用表面活性剂溶液检查连接处气密性。为了保证色谱定性和定量分析的准确性，载气流量要求恒定（变化小于1％），在气相色谱仪中一般都采用减压阀，稳压阀，或稳压阀和稳流阀串联使用，以控制气流的稳定。在使用这些阀时，输入压力应符合说明书的规定，以维持压力的稳定。 4.2.1.3气流的测量。气体的流速是以单位时间内通过色谱柱或检测器的气体体积大小来表示（ml/min），通常使用转子流量计和压力表换算法，观察直观方便，但不太准确，比较准确的方法是用皂膜流量计，它可以直接准确测出气体的流量。采用2～3mm内径填充柱用氮气为载气时，流速在30～60ml／min之间。现代仪器有电子流量检测器和电子压力控制器，可编程控制柱头压力和载气流量。 4.2.2进样系统。进样量的大小、进样时间的长短，直接影响到柱的分离和最终定量结果。在药物分析中大多是液体进样。 4.2.2.1微量注射器的使用。液体样品大都采用微量注射器进样，注射器取样后，针头刺入气化室进样口的密封硅橡胶垫，将液体样品推入气化室。为了达到进样重复性，在进样操作时必须注意： 4.2.2.1.1要用同一根或校准过的微量注射器进样。 4.2.2.1.2由于液体进样是用注射器刺入胶垫注入较高温度的气化室，针头内液体会因受热膨胀挤入气化室中，故每次进样操作应当一致，用同样方式和速度进样。以保证进样的准确和重现性。 4.2.2.1.3使用前应检查注射器针尖光滑性，使用后必须及时清洗干净。 4.2.2.2进样器。 4.2.2.2.1气化进样气相色谱液体进样需经加热使样品气化，由载气带入色 谱柱，因此要有气化室。为了避免气化的样品与金属接触产生分解，一般气化室装有玻璃或石英的插管，此种进样方法使未气化物体残留在插管内，应不时取出插管更换或清洗。 4.2.2.2.2柱上气化进样 为了避免样品的热分解及气化室死体积对样品稀 释与扩散作用，采用柱上气化进样，即色谱柱进口端一段不装填料，此段空管插 题目： 气相色谱操作规程 共10页 第3 页 入气化室，样品液直接注于填料上。此种进样法不适用于溶剂残留量测定，因其有大量不挥发供试品，结在色谱柱进口端。 4.2.2.2.3毛细管色谱柱进样器分为分流进样和不分流进样。分流进样气化室内插管内径较不分流进样大，并具有分流调节阀，以便调节分流比，分