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实验药理其中总结
实验药理学期中总结
一、实验药理学概论
1.实验药理学的研究内容:
药物的药理作用的试验研究
药物作用机理的实验研究
药理学实验技术
药理学试验设计
实验结果的分析
2.实验药理学的研究目的就是通过探讨药理学实验的特点和规律,使药理学实验符合科学、规范、准确的要求,能够有效地解决药理学研究中的实际问题,为药理学研究提供合理方法和技术保障。
3.实验药理学的特点主要表现为:
①以药理学的要求为核心研究实验技术和方法
②采用各种可以解决药理学科学问题的技术和方
③实验药理学的发展依赖于多学科的发展
④实验药理学的核心是创造性的将各种技术方法引入药理学研究中,通过药理学研究实现技术方法的进步和药理学理论的进步。
4.实验药理学的内容是根据药理学的特点进行分类,如:
受体药理学,酶药理学,心脏药理学,血管药理学,电生理药理。分子药理学实验研究
5.实验药理学的基本问题
1.给药方式:
1.1预防给药与治疗给药
1.2口服给药与注射(及其他)给药(动物实验)
1.3体外实验给药方式:
器官实验:药物与器官的接触,药物作用的时间
细胞实验:细胞在药物中的暴露时间,药物对细胞生存环境的影响
分子水平实验:药物对分子相互作用的影响;药物对生物靶分子的作用
2.给药剂量
2.1确定药物剂量的基本原则
能够反映药物的作用,能够反映药物作用的量效关系,与临床用药密切关联,符合实验要求(如动物给药量,实验环境改变)
2.2动物实验给药剂量的确定
①动物种属差异
②动物接受量的限定(动物胃容量、动物血容量、腹腔注射)
③已有药物有效剂量的可能信息(天然产物人用量,已有实验信息等)
④合理的计算方法(体重、体表面积等)
⑤预实验的必要性(选择适当指标进行多剂量预实验)
⑥急性毒性实验(以大剂量进行预实验,最小中毒量、致死量)
⑦体外实验的有效浓度(细胞分子水平的实验获得有效浓度,血浆浓度换算)
⑧给药途径(口服,静脉注射、腹腔注射、肌肉注射、皮下注射
2.3体外实验药物浓度的设定条件
①一般实验浓度:符合常用药物合理剂量
②实验类型(细胞实验、生物化学实验、分子生物学实验)
③可能的血药浓度,合理的给药量(10-4M-10-6M-10-9M);(100ug/ml,10ug/ml)
2.4体外实验剂量设置(分子水平实验)
药物作用的数学模型,对数曲线的制作,剂量的设置
2.5新药体外筛选的剂量设置
分子水平筛选方法-药物期待活性
样品的特点-化合物和混合物
一般剂量设置:10ug/ml,10-5M
3.动物选择
3.1动物选择的原则
①符合研究目的(能够反应所需要的症状)
②反应药物作用(易于观察药物作用)
③药物作用机制与人类相近(利于评价)
④符合实验要求(均一、稳定、背景清楚)
⑤符合动物管理规范
6.实验设计的3要素
①实验因素:可能影响实验指标的实验因素
②实验单元:接受实验处理的对象
③实验效应:反映实验处理效果的标志
8.实验设计的类型和特点
方差分析--单因素方差分析
方差分析--两因素等重复实验的方差分析
回归分析:一元线性回归分析:回归系数的最小二乗估计;一元非线性回归分析;多元线性回归分析
①正交设计:正交表是正交试验设计的工具,根据均衡分散思想,运用组合数学理论在拉丁方和正交拉丁方的基础上构造的一种表格
交互作用的正交实验设计
多指标实验
②参数设计
三次设计:系统设计,参数设计,容差设计
稳健设计:减少波动,寻找使得质量波动达到最小的可控因素的水平组合
灵敏度设计
③均匀设计:全面实验法;均匀设计表;使用表
二、膜片钳原理技术①细胞贴附式:在正常离子环境中研究递质和电压激活的通道,以及研究细胞膜不同部位的的电流。
②内面向外式:主要用于研究胞质成分对离子通道的影响
③外面向外式:用于研究细胞膜外侧受体控制的离子通道。
④全细胞记录:在一个细胞上可观察多种离子通道的活性,可测定细胞膜电位和动作电位
3.应用:
①金属离子作用于细胞膜行为的研究 ②细胞膜离子通道的性质鉴定及其动力学研究
③细胞分泌的研究 ④信号转导的研究 ⑤分子生物学研究
三、放射配基受体结合法
放射性同位素的应用和防护
放射配基结合测定法是可以定量测定配基与受体结合的参数的一种方法。与受体结合的配基可以是激素、神经递质、生长因子等内源性物质和相关药物。
放射配基结合测定法的基本操作是比较简单的,将含有受体的制备物与适当的放射配基一起温孵一段适当的时间,然后对与受体结合的放射活性进行测定。
主要包括三种类型的实验:饱和实验,竞争实验和动力学实验。
(一)饱和曲线
用一固定浓度的受体蛋白和不同浓度的放射配体一起孵育,将特异性结合与配体浓度作图,可画出一矩形抛物线即饱和曲线。
(二) 竞争结合试验
用于测定非标记药物与放射配体竞争同一受体的能力。常用非标记药物取代5
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