HBV-DNA分子诊断与应用-医院全面版.ppt

乙肝病毒结构 乙肝病毒DNA分子构造 分子技术在乙肝诊断与治疗中应用 乙肝病毒感染自然史 HBV-DNA定性/定量分析 HBV DNA定性/定量分析 HBV基因分型 根据HBV全基因核苷酸序列的差异，将不同病毒株分为不同基因型；目前HBV基因分型A.B.C.D.E.F.G.H共8个型 不同的基因型具有不同地域分布 我国主要是B\C型为主 北方－C型 HBV不同基因型地域分布 HBV基因分型检测临床意义 HBV基因分型 P区耐药位点检测 P区耐药位点检测 病毒的水平越低，耐药发生的几率越低 因素一： 因素二： 病毒变异需要突破的屏障 病毒发生耐药，需要突破药物的基因屏障，这些基因屏障就象是阻止病毒变异后攻城掠地的防御工事。不同的药物基因屏障高低不同。 基因屏障高的药物，耐药发生率低 低耐药屏障的药物 有些核苷类药物中只有1道抵抗病毒变异的屏障，因此，病毒容易突破屏障，耐药容易发生。 基因屏障高的药物，耐药发生率低 基因屏障高的药物，耐药发生率低 低耐药屏障的药物 拉米夫定、阿德福韦、替比夫定等药物，由于药物中只有1道抵抗病毒变异的屏障，因此，病毒容易突破屏障，耐药容易发生。 高耐药屏障的药物 而恩替卡韦由于药物中有3道抵抗病毒变异的屏障，病毒难以突破这3道屏障的重重保护，耐药发生的机率低。 耐药屏障——耐药突变位点数 因素三： 药物的化学结构 所有核苷类药物都能引起HBV耐药，但不同化学结构的药物耐药发生率有很大区别。 核苷类药物的分类 L-核苷类似物：如拉米夫定、替比夫定等 无环碳磷酸盐化合物：如阿德福韦 脱氧鸟苷类似物：如恩替卡韦 初治患者耐药发生率 多种药物耐药，给后续治疗带来严重困难 P区耐药位点检测 长期使用抗病毒药物可引起HBV耐药，引起耐药的基因突变位点主要集中于P区 耐药基因分析在临床药物选择上的应用 目前最常见P区耐药位点11个 （169、173、180、181、184、194、202、204、233、236、250） LAM 治疗基因型耐药的发生率 P区耐药病例分析 一名长期使用抗病毒药物拉米夫定治疗的病人，最近在日常HBV DNA检查中发现HBV拷贝数量有了很大升高，在换用替比呋啶后，情况仍然没有好转，如何处理？  拉米夫定 M204I/V L180M V173L 恩曲他滨 V173L L180M M204I/V 阿德福韦 A181V N236T 恩替卡韦 T184A（G/I/S) M250V 替比夫定 M204I/V C区位点突变与病情发展的关系 -T-G-G- C区常见位点突变 C区位点突变临床意义 前S区变异 1、前 S1 变异株以前 S1 蛋白 C 端 AA 183 缺失突变较多见，这种突变因影响 HBsAg 正常分泌，并使 L 蛋白发生蓄积而引起肝细胞病变和肝细胞对炎性因子的损伤更敏感。 2、前 S1 基因起病密码下游 230 位核苷酸（nt 230）可因突变形成 终止密码并影响前 S2 起始密码，可使 HBV 逃避干扰素治疗和 宿主免疫清除。 3、前S2 变异导致S2蛋白缺失，不能产生保护性抗体，HBV 逃避干扰素治疗和宿主免疫清除。 临床参考意义：与肝硬化，肝癌发生有一定关系 S区变异 145 G→A (G→R) 118 T→L 120 P→S 126 T→I 143 T→S 临床参考意义: 抗HBs识别HBsAg减弱, 肝炎疫苗失去免疫保护作用 S基因变异是疫苗免疫失败的重要原因 S 基因变异导致形成 HBsAg 阴性，抗 HBs 阳性，HBV-DNA 持续阳性的慢性乙型肝炎的重要原因 浅谈乙肝患者的生育问题 背景知识： 乙肝病毒对孕育有无影响？ 乙肝病毒感染对胎儿无致畸作用，也不引起先天性疾病 轻度肝炎对怀孕除早产率较高外，无其他影响 早期肝硬化如代偿功能良好，对怀孕无明显影响 肝硬化代偿不全的孕妇可能发生急性肝衰竭，胎儿有早产、自发性流产和死胎的可能性 孕育对乙肝病情有无影响？ 怀孕对肝功能的影响很小，怀孕不会加重肝脏病变 怀孕时血容量扩张、血液稀释而白蛋白降低，球蛋白可以代偿性增高 治疗期间怀孕了怎么办 所有核苷类似物都没有做过致畸试验（也不允许做） 已知的是治疗丙型肝炎的核苷类似物病毒唑（又称利巴韦林）有明确的致畸作用 目前的检测手段B超或羊水检查，都很难查出胎儿是否存在畸形 因此，治疗期间怀孕者需要夫妇双方共同协商，权衡利弊做出决策 慢性乙肝患者何时怀孕比较好 抗病毒治疗停药后6个月 经治疗肝脏病变稳定，反复检查肝功能转氨酶正常或轻微异常，没有明显波动时 转氨酶