HIV感染的血清学检测.ppt

HIV感染的血清学检测 内容 HIV抗体检测： HIV抗体筛查检测 HIV确认实验 HIV P24抗原检测： HIV抗体检测 HIV抗体检测可用于监测、诊断、血液筛查： 以监测为目的的检测是为了解不同人群HIV感染率及其变化趋势而进行的检测，检测的人群包括各类高危人群和一般人群。 以诊断为目的的检测是为了确定个体HIV感染状况而进行的检测，包括临床检测和自愿咨询检测、术前检测、根据特殊需要进行的体检等。 以血液筛查为目的的检测是为了防止输血传播HIV而进行的检测，包括献血员筛查和原料血浆筛查。 HIV抗体检测分为筛查试验（包括初筛和复检）和确认试验 HIV抗体试剂盒进展 代次 抗原 方法 特异性检测 检测时间 1 全病毒 间接 IgG 抗体HIV-1 2个月 2 重组或多肽 间接 IgG 抗体HIV-1 / -2 3-4 周 3 重组+多肽 夹心 IgM / IgG 抗体 4-7 天 HIV-1 / -2 / -O 4 抗原+抗体 夹心 IgM / IgG 抗体 抗原 5pg HIV-1 / -2 / -O p24 抗原 HIV抗体筛查检测 程序 筛查、复检、确认 原理 酶联免疫、凝集、层析 标本 血液、唾液、尿液、组织液 产品 ELISA、快速、简单 筛查试剂要求 HIV ?混合型 国家SDA生物诊断试剂注册批准 批检合格 临床评估质量优良 筛查方法： 常用的筛查方法是酶联免疫试验（ELISA） 快速检测（RT）及其它检测 (1)明胶颗粒凝集试验(PA) (2)斑点EIA或称斑点ELISA (dot-EIA) (3)斑点免疫胶体金（或胶体硒）快速试验 (4)艾滋病唾液检测卡 尿液HIV抗体检测 一、酶联免疫试验：ELISA （一）斑点EIA或称斑点ELISA（dot-EIA） 以硝酸纤维膜为载体，将HIV抗原滴在膜上成点状，即为固相抗原。加血清样品作用，以后步骤同ELISA。 阳性结果在膜上抗原部位显示出有色斑点。反应时间在10 min以内，使用抗原量少。 （二）免疫胶体金（或胶体硒）快速试验 与斑点EIA相似，也是以硝酸纤维膜为载体。 区别在于不用酶标记抗体，而代之以红色的胶体金（或胶体硒）A蛋白，用渗滤法作为洗涤方法。 稳定，可室温长期保存。试验不需任何设备，迅速、简便、特异性较好，敏感性约相当于中度敏感的ELISA，适用于应急检测、门诊急诊个体检测。 已有被SFDA批准注册的进口试剂和国内产品。一般可在10?30min内判读结果。 注意事项 非EDTA抗凝的血浆样品可能会 得到不正确的结果 反应条颜色深浅的程度与样品中 抗体的滴度没有必然的联系 结果的判断 …… （三）艾滋病唾液检测卡 在硝酸纤维膜上包被人工合成的HIVgp41/gp36蛋白抗原，可同时检测含在唾液中的HIV-1/HIV-2抗体，原理为酶免疫间接法。 主要检测唾液中的HIV IgA与IgG抗体，敏感性特异性与ELISA相近，可避免静脉穿刺。但样品预处理时间长且售价较高。 以唾液为样品测定HIV抗体的ELISA、免疫印迹法（WB）试剂已经美国FDA批准。 （四）明胶颗粒凝集试验（PA） PA是HIV血清抗体检测的一种简便方法，是将HIV抗原致敏明胶颗粒作为载体，与待检样品作用，混匀后保温（一般为室温）。当待检样品含有HIV抗体时，经抗原致敏的明胶颗粒与抗体发生抗原-抗体反应，根据明胶颗粒在孔中的凝集情况判读结果。 PA试剂有两种，HIV-1和HIV-2抗原共同致敏的PA试剂（AFD HIV-1/2 PA），已经我国食品药品监督管理局（SFDA）注册批准；HIV-1、HIV-2抗原分别致敏的PA试剂（SERODIA-HIV-1/2）可初步区分HIV-1型和HIV-2型，目前我国尚未引进。 尿液测定 采样优点，尤其对吸毒者标本 机理：IgA为主，IgG少量 HIV-1型抗体 阳性结果务必用血清学检测 快速试剂的应用 偏远地区 急诊 临床（高危） 职业暴露 临产 结果报告：