几种促进因子对中性蛋白酶活力影响比较.docx

几种促进因子对中性蛋白酶活力影响比较吴京平(北京联合大学师范学院,北京100011)摘要:分别探讨了2种天然有机物(F、K)和3种金属离子(Ca2+、Mn2+、Mg2+)对1398中性蛋白酶活力的影响。采用福林法测定了酶的最适反应条件,分别确定了天然有机物和金属离子的最适工作浓度,较系统地考察了它们对酶活的影响,并就对蛋白酶活力的促进作用进行比较,于金属离子。关键词:1398中性蛋白酶;金属离子;天然有机物;酶活力结果表明天然有机物均优中图分类号:TS201.2文献标志码:A文章编号:1005-9989(2008)06-0012-04CompareeffectoftwonaturalorganiccompoundsandthreemetalionsontheactivitiesofneutralproteinaseWUJing-ping(NormalCollegeofBeijingUnionUniversity,Beijing100011)Abstract:Thispaperstudiedtheactivityof1398proteaseeffectedbytwonaturalorganiccompoundsandthreemetalions.TheoptimumreactionconditionsofproteaseweredeterminedbyFlin.Theoptimalconcentrationofnaturalorganiccompoundsandmetalionsweredetermined.Compareeffectoftwonaturalorganiccompoundsandthreemetalionsontheactivitiesofneutralproteinase.Theresultshowedthatthebetteractivityof1398proteasewasgetbynatureorganiccompounds.Keywords:1398neutralprotease;metalion;natureorganiccompound;enzymeactivity蛋白酶是一种应用广泛而重要的酶制剂,其在食品加工、制造蛋白质水解物、用作除蛋白剂、用于革新工艺提高产品质量、作为医药和饲料添加剂等诸多方面用途广泛[1-4]。而微生物中性蛋白酶除在皮革、皮毛、丝绸、洗涤剂及医药等行业中有较多应用外,还在食品工业中的肉和鱼类加工、啤酒酿造、烘烤食品以及饮料等加工中发挥重要作用[5]。但由于传统工艺所生产的蛋白酶质量不稳定,酶活较低,在生产中不易控制,而相应的基础研究又很欠缺和滞后,所以酶在生产实际中的应用受到了一定的限制[6]。目前关于寻找生产高活性蛋白酶的菌种及制备方法等研究报道较多,而针对提高蛋白酶活力的激活剂(促进剂)的研究却较少报道,更少见复方促进剂的研究。我们分别考察了2种天然有机物和3种金属离子对收稿日期:基金项目:作者简介:2007-09-03北京市教委资助项目。吴京平,副教授,研究方向为有机化学、食品科学和应用酶学。!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!![4]张灏,华伟,郭本恒,等.乳杆菌耐胆汁、降解结合胆盐和同化胆固醇能力的研究.工业微生物,2003,33(2):23-26[5]卜永士,郭本恒.乳酸菌对胆固醇降低作用的研究.上海水产大学学报,2004,13(4):371-374[6]赵瑞香,孙俊良,等.嗜酸乳杆菌同化MRS培养基中胆固醇能力的研究.中国微生态学杂志,2005,17(4):254-25512食品添加剂食品开发与机械1398中性蛋白酶的激活作用,实验结果表明,各种内贮存,有效期为3d。100μg/mLL-酪氨酸标准溶液:称取预先于105℃干燥至恒质量的L-酪氨酸0.1000g,精确至0.0002g,用1mol/L盐酸60mL溶解后定容至100mL(即为1mg/mL酪氨酸标准溶液)。吸取1mg/mL酪氨酸标准溶液10.00mL,用0.1mol/L盐酸定容至100mL(即得到100μg/mLL-酪氨酸标准溶液)。0.5mol/L氢氧化钠溶液:按GB601配制。因子对该酶均有不同程度的促进作用,为复方蛋白酶促进剂的进一步研究和开发提供科学依据。材料和仪器11.1主要材料天然有机物(F、K):本课题组提供;1398中性蛋白酶:北京市房山区酶制剂总厂。干酪素、L-酪氨酸、三氯乙酸、无水碳酸钠、氢氧化钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、四硼酸钠、钨酸钠、钼酸钠、磷酸、浓盐酸、浓溴水等各种化学试剂:分析纯。2实验过程与结果中性蛋白酶的最适反应条件最适温度实验在pH值7.