胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞生长状况及ABCA3表达变化的初步.pdfVIP

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2017-12-14 发布于河北
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胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞生长状况及ABCA3表达变化的初步

南京医科大学学报（自然科学版）第卷第期 32 11 （）年月 · · ACTA UNIVERSITATIS MEDICINALIS NANJING Natural Science 2012 11 1488 胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞生长状况及ABCA3 表达变化的初步研究 * 张盼，张晓群，邱洁，杨洋，周晓玉，周晓光（南京医科大学附属南京儿童医院新生儿科，江苏南京 210008 ）［摘要］目的：观察原代培养胎鼠肺泡型上皮细胞（，）的生长状况及特异性蛋 Ⅱ type Ⅱalveolar epithelial cell AEC Ⅱ AEC Ⅱ 白结合盒转运蛋白（，）的表达变化，为有关新生儿肺发育及肺部疾病的研究 ATP A3 ATP binding cassette transporter A3 ABCA3 奠定一定基础。方法：采用胰酶联合胶原酶消化肺组织，差速离心及差速贴壁法纯化细胞；电子显微镜鉴定AEC Ⅱ细胞；倒置相差显微镜观察不同时间点细胞生长状态；MTT 法绘制细胞生长曲线；免疫荧光技术观察 ABCA3 动态表达变化。结果：电镜下观察到特征性板层小体，大小及数量不等，胞膜外缘分布有刺状微绒毛；法测得铺板后第、、、、、的 AEC Ⅱ MTT 24 36 48 72 96 120 h 吸光度值分别为，，，，，。光学显微镜下细胞形 0．177 ± 0．009 0．193 ± 0．011 0．212 ± 0．019 0．253 ± 0．019 0．243 ± 0．012 0．192 ± 0．011 态逐渐拉长，变扁平，细胞内颗粒逐渐减少。免疫荧光示ABCA3 表达逐渐下降。结论：原代培养的胎鼠AEC Ⅱ在培养早期生长状况最佳，表达最丰富，故在早期（即培养以内）进行肺发育疾病相关机制的研究较为理想。 ABCA3 72 h ［关键词］胎鼠；肺泡型上皮细胞；原代培养；细胞增殖；结合盒转运蛋白 Ⅱ ATP A3 ［中图分类号］［文献标识码］［文章编号］（）