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幽门螺杆菌感染细胞模型的建立及感染相关microRNAs的筛选鉴定

· 18 · 现代生物医学进展 Progress in Modern Biomedicine Vol.11 NO.1 JAN.2011 幽门螺杆菌感染细胞模型的建立及感染相关microRNAs 的筛选鉴定* 1 1 2 2 2 2 2△ 刘 真 贾赤宇 肖 斌 唐 彬 黎伯胜 毛旭虎 邹全明 1 309 100091 2 400038 (解放军 医院整形美容烧伤修复中心 北京 ;第三军医大学临床微生物及免疫学教研室 重庆 ) H. pylori H. pylori microRNAs miRNAs 摘要 目的:建立稳定的幽门螺杆菌( )感染人胃上皮细胞模型;筛选并鉴定 感染相关 ( )的表 达,为深入研究感染相关miRNAs 的调控作用机制奠定基础。方法:将H. pylori 标准株按MOI=100:1 感染人胃上皮细胞,通过检 测炎性细胞因子及炎症反应关键酶的表达综合评价感染模型;采用博奥公司miRNAs V3.0 芯片分析细胞感染前后miRNAs 表达 PCR Northern miRNAs H. pylori 24 h 谱变化,运用实时定量 技术和 杂交对表达显著差异的 进行分析鉴定。结果: 感染细胞 后,细 IL-8 (P0.01) COX-2 H. pylori 胞分泌促炎细胞因子 显著升高 ;启动炎症反应的关键酶 的表达明显增加。芯片数据显示: 感染引起 2 miRNAs PREDICTED-MIR191 miR-155 miR-92b miR-30b miR-146a miR-16 超过 倍显著差异表达的 包括:表达上调的 、 、 、 、 、 等,和 miR-181b miR-324 PCR Northern miR-155 miR-146a H. pylori 表达降低的 、 。实时定量 和 杂交结果显示感染相关 和 在 感染细胞模 (P0.01) miR-155 miR-146a H. pylori 型中表达均显著增加 。结论: 和 在感染细胞模型中的表达增加提示二者可能参与 感染的免疫 调控过程。 microR

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