缺血再灌注损伤论文：吡格列酮对缺血再灌注大鼠心肌细胞内质网应激致凋亡途径的影响.docVIP

缺血再灌注损伤论文：吡格列酮对缺血再灌注大鼠心肌细胞内质网应激致凋亡途径的影响 【中文摘要】观察PPARγ（过氧化物体增殖物激活受体）激动剂吡格列酮预处理，对心肌缺血再灌注所致的细胞凋亡及内质网特有伴侣蛋白GRP78、凋亡水解酶caspase-12表达的影响,探讨吡格列酮在内质网应激途径的心肌保护作用。方法：健康雄性Wistar大鼠，体重200±30 g，随机分为假手术组，缺血再灌注组（I/R组）以及吡格列酮预处理组。I/R组及假手术组灌服生理盐水，2ml/d，共7d,吡格列酮预处理组再分为3组，分别给予吡格列酮3mg/kg.d（低剂量组）, 10mg/kg.d（中剂量组）,20mg/kg.d（高剂量组），溶于2ml生理盐水中灌胃，共7d。制作大鼠心肌缺血再灌注损伤模型:气管插管、动物呼吸机维持呼吸，监测心电图变化，开胸，结扎冠状动脉前降支30min，再灌注2h。造模成功后腹主动脉采血，离心，分离血清，采用全自动生化仪检测各组血清中LDH、CK-MB水平；取出心脏，洗净血污，留取左心室前壁，石蜡包埋、切片后，采用TUNEL（原位末端标记）染色法检测各组心肌细胞凋亡数，采用SABC（链酶亲和素-过氧化物酶）免疫组织化学法检测GRP78及caspase-12蛋白的表达，并对其表达进行半定量分析。结果：1. I/R组大鼠血清中LDH、CK-MB水平均明显高于假手术组(p0.05)，不同剂量吡格列酮预处理后血清LDH、CK-MB水平明显低于I/R组（p0.05），但吡格列酮3mg组和10mg组相比无显著差异（p0.05）。2. I/R组心肌细胞凋亡指数比假手术组明显增多（p0.05）。低、中、高剂量吡格列酮预处理各组的细胞凋亡指数较I/R组显著降低（p0.05），吡格列酮3mg组和10mg组相比无显著差异（p0.05）。3. I/R心肌组织中caspase-12、GRP78蛋白的表达与假手术组比较明显升高（p0.05）、给予大鼠吡格列酮预处理治疗后，再作缺血再灌注模型，3种剂量吡格列酮预处理组与I/R组比较都显著减少了心肌细胞蛋白GRP78及caspase-12表达（p0.05），但吡格列酮3mg组和10mg组相比无显著差异（p0.05）。结论：吡格列酮可通过抑制I/R导致的过度内质网应激，下调GRP78、caspase-12表达水平，减轻内质网应激相关凋亡而减轻心肌缺血再灌注损伤,且大剂量吡格列酮的心肌保护作用更明显。 【英文摘要】: To observe the effect of PPAR gamma (peroxisome proliferator activated receptor )agonist pioglitazone pretreatment on myocardial ischemia reperfusion myocardial apoptosis andon the expression of GRP78 and Caspase-12 proteins in rats.so as to explore the the endoplasmicreticulun stress signaling pathways for pioglitazone in protection of m yocardium.Methods: male Wistar rats, the ordinary diet feeding. Weight 170-230g, were randomly dividedinto sham operation group, the I / R group and pioglitazone preconditioning group. pioglitazonepreconditioning group was further divided into 3 groups, were infused orally with pioglitazonein , 3mg/kg.d 10mg/kg.d 20mg/kg.d soluble in 2ml saline gavage and sham operation group andI/R group were infused orally with 0.9%sodium chloride solution,2ml/d, a total of 7 days. Theischemia/reperfusion injury rats models were produced: tracheal intubation using animalventilator breathing, electrocardiogram, ligation of the anterio