第二节 荧光探针的技术基本知识.pdf

第二节 荧光探针技术基本知识介绍 1 什么是荧光？ 紫外线 紫外线 荧光素溶液 罗丹明溶液 22 一、荧光探针技术的基本概念 3 hv 4 hv ＇ hv 5 （一）荧光 （fluorescence ） Luminescence is the emission of light from any substance and occurs from electronically excited states. Luminescence is formally divided into two categories, fluorescence and phosphorescence , depending on the nature of the excited states. The electron in the excited orbital is paired ( of opposite spin ) to second electron in the ground-state orbital. Consequently, return to the ground state is spin-allowed and occurs rapidly by emission 8 -1 of a photon. The emission rates of fluorescence are typically 10 s , so that a typicalfluorescence lifetime is near 10ns(1010-9s). ——Principles of Fluorescence Spectroscopy, Joseph R. Lakowicz 6 （二）基态、激发态、单重态、三重态、激发单重 态、激发三重态 分子都含有不停地运动着的电子。根据量子学理论，运动 着的电子处于一系列不连续的能量状态 （即能级），可以从一 个能级向另一个能级跃迁，并伴随着与能级差相对应的特定能 量的吸收和释放。一般情况下，电子总是处于能量最低的能级 （即基态, ground state ）。在一定条件下，电子可以吸收能量 （如光能、电能、热能、化学能、摩擦能等）跃迁到较高能级 （即激发态, excited state ），这个过程称为激发。处于激发态 的电子是不稳定的，它总是要跃迁回基态，并将多余的能量释 放出去。跃迁的方式可能是辐射跃迁，也可能是非辐射跃迁。 以非辐射方式跃迁