甘草悬浮培养细胞对芦荟大黄素的选择性糖基化-中国医药生物技术.PDF

248 中国医药生物技术 2015 年 6 月第 10 卷第 3 期 Chin Med Biotechnol, June 2015, Vol. 10, No. 3 DOI: 10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2015.03.010 ·论著· 甘草悬浮培养细胞对芦荟大黄素的 选择性糖基化 张德武，陶小宇，余利岩，戴均贵 【摘要】 族大学杨林副教授鉴定为乌拉尔甘草（Glycyrrhiza 目的 研究甘草悬浮培养细胞对芦荟大黄素的生物转化。 uralensis Fisch ）。种子细胞由本实验室诱导，继代 方法 将芦荟大黄素与甘草细胞悬浮培养细胞共孵育 7 d 培养，并保藏于本实验室。 后，培养液经由大孔吸附树脂处理，细胞用甲醇提取，合并 1.1.2 仪器 AutoSpec Ultima-TOF 质谱仪为美 两部分浸膏后依次采用 Sephadex LH-20 凝胶柱色谱、正相 国应用生物系统公司产品；MP-400 及 ARX-500 硅胶柱色谱、反相半制备 HPLC 等技术进行分离纯化，利 型核磁共振波谱仪为美国布鲁克公司产品；岛津 用质谱和核磁共振波谱技术进行结构鉴定。 LC-6AD 型半制备型高效液相色谱仪为日本岛津 结果 分离得到了一个芦荟大黄素的选择性糖基化产物—— 公司产品；Adsorbosphere XL C18（250 mm × 10 mm， 芦荟大黄素-(3-羟甲基)-O-β-D-葡萄糖苷。 5 μm ）反相半制备色谱柱为美国 WR Grace 公司 产品。 结论 甘草悬浮培养细胞对芦荟大黄素具有位置选择性糖 1.1.3 试剂 分析纯的乙醇、甲醇、氯仿、丙酮、 基化能力。 石油醚为北京化工厂生产；色谱级甲醇和乙腈为美 【关键词】 芦荟大黄素； 甘草； 糖基化； 悬浮培 国 Burdick Jackson 公司生产；柱色谱用硅胶和 养细胞 GF254 硅胶板为烟台市化学工业研究所生产； 中国医药生物技术, 2015, 10(3):248-251 Sephadex LH-20 由美国 GE 公司生产。 1.1.4 细胞培养基 MS 培养基：NH NO 1.65 g/L 、 芦荟大黄素（aloe-emodin ）是蓼科植物掌叶大 3 3 KNO 1.90 g/L 、KH PO 0.17 g/L 、MgSO ·7H O 黄的根和块茎中的一种活性成分，属于蒽醌类化合 3 2 4 4 2 0.37 g/L、CaCl ·H O 0.44 g/L、KI 0.83 mg/L 、H BO 物。作为来源于传统中药的一种重要的活性成分， 2 2 3 3 6.20 mg/L、CoCl ·6H O 0.025 mg/L、Na MoO ·2H O 该化合物具有抗炎、抗菌、抗氧化、抗肿瘤、