厌氧发酵有机酸体系中NAD%2b和NADH测定方法的建立厌氧发酵有机酸体系中NAD%2b和NADH测定方法的建立.pdf

食品科技 良品安至与植测 FoODSCIENCEANDTECHNOLOCY 厌氧发酵有机酸体系中NAD+和 NADH测定方沽的建立 李建，陈可泉，黄秀梅，杨卓娜，姜岷+。韦萍 (南京工业大学制药与生命科学学院材料化学工程国家重点实验室，南京210009) 摘要：建立一种酶法高效测定厌氧发酵有机酸体系中NAD+和NADH的方法。利用酶循环机理， 以1．0mol／LBieine mmol／L mmol／L EDTA(pH8．0)、4．2M‘兀、16．6 buffer(pH8．0)、纯乙醇、40 mmol／L nm处 PES和50¨L的乙醇脱氢酶作为混合反应体系，采用紫外可见分光光度计在570 mol／L 测定吸光值变化情况，能将发酵体系中的NAD+和NADH准确定量，检出限分别力1．3x104 和5．9xlO。6 体系中的NAD+和NADH含量，对于指导厌氧发酵体系辅酶代谢调控分析具有重要意义。 关键词：NAD+；NADH；厌氧发酵；酶法 中图分类号：Q525 文献标志码：A 文章编号：1005—9989(2008)12—0254—04 EstablishmentofthedeterminationofNAD+andNADHinthe anaerobicfermentationof acids organic LI Jian,CHEN Xiu-mei，YANGZhuo-na，JIANGMin．，WEIPing Ke_q眦n，HUANG ofMaterials-OrientedChemical ofLifeScience (StateLaboratory Key Engineering，College Pharmaceutical of and University 21 Engineering，NanjingTechnology。Nanjing0009) Abstract：Anmethodfor NAD+andNADH efficientinthe enzyme determining highly anaerobicfermentalion brothwas the mollLBicine mmol／L developed．Usingmechanism，1．0 buffer(pH8．O)，pureethanol，40 recycling mmol／L mMPESand MTT，16．6 50止alcohol asmixedreaction EDTA(pH8．0)，4．2 dehydrogenase atthe