实验一 普通光学显微镜及其使用实验一 普通光学显微镜及其使用.ppt

细胞生物学实验 xxx 2015. 9 前言 细胞生物学实验课的教学目的，主要是通过基本技能训练以及观察分析实验结果，使学生了解并掌握有关的实验技术原理和操作方法，进而培养学生动手实践、观察分析和解决问题的能力。为达到此目的，实验内容自成体系，着眼于加强学生的基末技能训练，以及观察分析问题和科学思维能力的培养。 细胞生物学实验绘图方法与要求 一、在仔细观察的基础上，选择典型结构进行描绘，要求真实、准确 注意各部结构的比例关系。 二、用铅笔绘图，线条要明确清晰，图的深浅明暗一律以点的疏密来表示，点要圆而一致，不得涂暗影或进行其它美术加工。 三、各部结构名称要在一侧引直线注明。各引线要平行不得交叉。 四、每幅图的大小、位置在纸面上必须安排得当并注意纸面的整洁。 实验室规则 一、遵守实验纪律，按时到达实验室，不得迟到或早退。实验中途因故需外出时应向任课教师请假。 二、保持实验室安静，不许在实验室内大声喧哗及随意走动。 三、必须严肃认真地进行实验。实验期间不得进行任何与实验无关的活动。 四、实验室内各组仪器及器材由各组自已使用，不得互相调换。要爱护仪器、标本和设备。如遇仪器损坏或不灵，应及时报告任课教师，以便修理或更换，不要自行乱修。损坏器材或设备者应按有关规定进行赔偿。 五、注意节约实验材料、药品和水、电等。 六、保持实验室内清洁整齐。实验结束后，各组必须认真清理各自的实验台面，将器材清洗后点清数目，然后摆放整齐。班级值日生负责清扫室内卫生，关好水、电开关和门、窗等，经教师允许后方可离开实验室。 七、有不遵守上述要求者，任课老师将终止其实验，并取消其当堂实验成绩。 实验一、 普通光学显微镜及其使用 一、实验目的 了解光学显微镜的构造及其工作原理，并熟练掌握其操作方法。 二、实验用品 普通复式光学显微镜、载玻片、盖玻片、香柏油、生物制片标本、滤纸及擦镜纸等。 三、实验原理 普通光学显微镜是我们观察细胞形态最常用的工具，从构造上可分光学、机械和电子三大系统。其所用光源为可见光(或紫外光)，故其分辨率(Resolution)存在有一个无法突破的限制。 普通光学显微镜 普通生物显微镜由3部分构成，即：①照明系统，包括光源和聚光器；②光学放大系统，由物镜和目镜组成，是显微镜的主体，为了消除球差和色差，目镜和物镜都由复杂的透镜组构成；③机械装置，用于固定材料和观察方便。 分辨率是指显微镜能将近邻的两个质点分辨清楚的能力，通常是用相邻两点间的距离(D)来表示。其公式如下： D=0.612λ/ N.A. 分辨率的数值越小，显微镜的分辨能力就越大，反之越小。由上述公式可以看出，分辨率的数值与波长成正比，与镜口率(N.A.)成反比。因此，要想得到高分辨率必须要缩短波长和加大镜口率。镜口率的大小决定于镜口角的大小和物镜与标本间介质折射率(refraction coefficient)的大小。其计算公式如下： N.A.=n?sinα/2 其中，n为物镜与标本之间介质的折射率；α为镜口角（聚光器交点对物镜镜口的张角）。对于干燥物镜来说，介质为空气，镜口率一般为0.05~0.95；而油镜用香柏油为介质, 镜口率可接近1.5。限制光镜分辨率的关键因素是光的波长(光的衍射效应)，光镜无论制作得如何精密都无法突破这一极限，因此一般光镜设计的最大放大倍数为1,000~1,500。即将0.2μm的质点放大到0.2~0.3mm(人肉眼的分辨率)就可辨认清楚。 四、作业 1、写出使用普通光镜进行显微装片观察的正确方法和步骤。 2、利用光镜和装片进行生物显微绘图。 （注：本实验为验证性试验。） 特别注意： 1、为保护镜头和装片的清洁，本次试验不使用100倍物镜和香柏油进行观察。如有必须使用的情况，请与实验老师联系后再进行。并且在观察完毕后必须及时用擦镜纸蘸取有机溶剂（二甲苯）彻底清洗物镜镜头和装片。 2、实验中必须爱护实验仪器和用品。切勿损坏显微镜及显微装片。