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华中科技大学
硕士学位论文
乙肝病毒X蛋白对凋亡蛋白PDCD5表达的实验研究
姓名：郭锋伟
申请学位级别：硕士
专业：外科学（普外科）
指导教师：赵志辉
2011-05
华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文
乙肝病毒 X 蛋白对凋亡蛋白 PDCD5 表达的实验研究
摘 要
[目 的]
建 立 以 及 鉴 定 转 基 因 细 胞 L02/HBX ， 在 获 得 阳 性 克 隆 细 胞 后 ， 通 过
RT-PCR,western-blot对PDCD5的mRNA与蛋白的检测，研究乙肝病毒X蛋白（Hepatitis
B virus X protein, HBx）对凋亡蛋白PDCD5的表达。
[方 法]
（1）复苏及培养L02细胞，应用G418筛选L02细胞，得到细胞最低致死浓度。
（2）建立转染HBx基因的L02 (L02/HBX)细胞系，并通过RT-PCR,western-blot进行
鉴定，确定HBx基因转染成功。
（3）通过Real-time PCR和Western Blot检测转染HBx基因后PDCD5mRNA和蛋白表达;
[结 果]
（1）复苏并培养L02细胞，经G418筛选得知，当G418浓度在500-700ug/ml时，L02
细胞全部死亡；当G418浓度在500ug/ml以下时，L02细胞均可存活。所以经过
试验得出L02细胞的最低致死浓度为500ug/ml。
（2）将 HBx 基因转入 L02 肝细胞中，以 500ug/ml G418 筛选出转染 HBx 的阳性克隆
L02 细胞。以 RT-PCR 和 western-blot 检测 HBx mRNA 和蛋白的表达，确保成功
建立转染HBx基因的L02 (L02/HBX)细胞系。
（3）转染HBx基因的L02细胞中PDCD5 mRNA和蛋白中的表达水平上调。
[结 论]
HBx上调凋亡蛋白PDCD5的表达进一步显示了其同细胞凋亡的关系是非常复
杂的，可能对细胞凋亡具有双重调节作用。
[关键词] 乙型肝炎病毒X蛋白；凋亡；PDCD5
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华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文
The study of experiment of the influence of Hepatitis B virus X
protein to Apoptosis protein PDCD5 expression
Abstract
Objective :
To establish and cultivate the L02/HBx cytes.Testing the quantity of mRNA and protein
of HBX gene in order to insure the establishing cytes is succeeful. And then, to
investigate the influence of Hepatitis B virus X protein to PDCD5 expression.
Methods:
(1) Revive and cultivate the L02 cytes in order to obtain the minimal concentration of
G418 that kill the L02 cytes.
(2) The Liposom
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