129例血培养患者外周血淋巴细胞亚群结果分析.docVIP

精品论文 参考文献 129例血培养患者外周血淋巴细胞亚群结果分析 山西省阳泉市第一人民医院检验科 045000；上海交通大学医学院附属瑞金医院上海血液研究所 200020* 在当今抗生素和激素广泛应用以及有创诊疗技术的发展，血液感染发病率逐渐升高，而菌血症治疗时间长，费用多，病死率高，危害极大。血培养是血液感染诊断的金标准，但培养时间长，即使阴性也不能除外感染，淋巴细胞及其亚群作为机体免疫功能的一个重要指标，在病原菌感染后，会发生一系列数量和比例的变化。本研究选择129例血培养患者，回顾性分析其外周血淋巴细胞亚群数量的变化，找出其规律，为临床对菌血症的诊断、治疗提供理论依据。 1.资料与方法 1.1.资料：本次研究选取2013年10月至2014年11月在本院住院同时进行血培养及外周血淋巴细胞亚群测定的患者129例，男81例，女48例，年龄18-70岁（平均年龄44plusmn;22岁），患者除感染外均无其他已知影响机体免疫功能的疾病发生，感染的诊断符合世界卫生组织（WHO）诊断标准［1］，且送检血培养与淋巴细胞亚群送检时间不超过24小时，并选同期健康体检人员36例作为健康对照组，男21例，女15例，平均年龄43plusmn;19岁。 1.2.方法： 1.2.1试剂与仪器：美国BD公司BACTEC9120全自动血培养仪及BD公司配套血培养瓶，美国BD公司PHOENIX-100全自动细菌鉴定药敏系统及原装配套试剂，美国贝克曼公司FC-500流式细胞分析仪，稀释液（COULTER ISOTON Ⅲ DILUENT），清洗液（COULTER CLENZ），四色复合试剂异硫氰酸盐荧光素（FITC）标记的CD45、藻红蛋白（PE）标记的CD4、藻红蛋白-得克萨斯红（ECD）标记的CD8、藻青蛋白5（PC5）标记的CD3。双色复合试剂FITC标记的CD3、PE标记的CD（16／56）。单色试剂PC5标记的CD19，藻青蛋白7（PC7）标记的CD45。 1.2.2血培养：静脉采血16-20ml立即注入厌氧菌和需氧菌培养瓶各1瓶，每瓶8-10ml，并送实验室，实验室接受标本编号、登记后，将血培养瓶置BD公司BACTEC9120全自动血培养仪中培养；当仪器阳性报警时，用无菌注射器抽取培养液涂片、革兰氏染色、镜检，根据染色镜检结果接种营养血平板和/或巧克力平板，置于37℃孵育24h，待菌落形成后挑取单个菌落配成0.5个麦氏单位菌液置BD公司PHOENIX-100全自动细菌鉴定药敏系统对病原菌鉴定，另取菌落涂片、革兰氏染色、镜检确认。 1.2.3.淋巴细胞亚群检测：静脉采集外周血2 ml加入EDTA-K2抗凝管中。取两管分别标记T、Bamp;NK，分别加入抗凝血100ul，Ｔ系四色荧光素抗体２０ul加入T管；CD45、CD19、CD3单色荧光素抗体，CD16/56 单色荧光素双抗体各20ul加入Bamp;NK管。两管轻轻混匀，避光染色15min后，均再加入500ul裂解液混匀，避光10min取出，300g离心5min，弃去上清液，加2ml0.01MPBS液洗涤，离心弃去上清液，再加入0.5ml0.01MPBS混匀，上流式细胞仪检测。 1.3.统计学分析： 采用SPSS17.0统计软件进行统计分析，计数资料以 plusmn;s 表示，组间比较采用t检验分析，以Plt;0.05为差异有统计学意义。 2．结果 本次入选129例患者血培养结果中，病原菌阳性生长93例，阴性36例，且阳性结果均已排除污染菌。分组按有菌生长组和无菌生长组，且有菌生长组又分为革兰氏阴性细菌感染组、革兰氏阳性细菌感染组、混合细菌感染组、真菌感染组，结果显示有菌生长组总T淋巴细胞、T4淋巴细胞、4/8较健康对照组明显升高（Plt;0.05），革兰氏阴性感染组患者总T淋巴细胞、T4淋巴细胞、4/8、DP-T淋巴细胞、B淋巴细胞百分含量较健康对照组明显升高（Plt;0.05）。革兰氏阳性组T4淋巴细胞、4/8比值与对照组有统计学意义（plt;0.05）。真菌感染组总T淋巴细胞、T4淋巴细胞、4/8比值较健康对照组明显减少（Plt;0.05）。无菌生长组T4淋巴细胞百分比增高（Plt;0.05）。见附表。 3．讨论 淋巴细胞是机体免疫反应中主要作用细胞。机体在正常情况下，各淋巴细胞亚群保持一定的数量和比例，协同调节，实现机体免疫功能正常运行。而当病原微生物侵入机体时，免疫应答会使淋巴细胞亚群的数量或功能发生变化，导致机体免疫功能失调