染色体步移试剂盒说明书.doc

DNA Walking步移法加速试剂盒（扩增未知侧翼序列的最佳方法） | [] [] Nature杂志2006年九月版关注产品！ 科研人员已经发展了几种无需建立cDNA库或筛选克隆的PCR技术方法，用于获取与已知序列相连的未知序列。这些PCR方法包括反向PCR (IPCR)，连接介导PCR (LM-PCR)和随机引物PCR (RP-PCR)。虽然这些方法有一定的效果并被不断改进，但是仍然受制于繁琐的酶切，适配体连接 (adaptor ligation)和纯化步骤。而且，RP-PCR的随机引物经常会因为非特异性退火而产生多余产物。DNA步移法加速试剂盒通过应用专利的ACP（复性控制引物）技术，提高了小片断寡聚核苷酸的特异性，可以克服现有基因步移法的缺点。 DNA步移法加速试剂盒由PCR酶混合物与用于捕获未知目标序列的高特异DNA Walking ACP (DW-ACP)引物组成。据此优化的PCR反应条件（以下称为DW ACP-PCR技术）可以获取长达3kb的未知侧翼序列。 一种全新的扩增未知目标序列的快速PCR方法。 试剂盒由PCR Master Mix和专为高特异度捕捉未知靶点的独特DNA步移退火控制引物(DW-ACPs)组成。此最优化的PCR条件，称为 DW ACP-PCR TM技术，可以获取长达3kb的未知侧区。此试剂盒是直接扩增未知序列的革命性方法。 Nature Product focus-Transgenics September 7, 2006! 特点： *最简单 此方法无须建库，无须酶切，无须固定，也无须复杂PCR *最快捷 你的目标产物可在一天内获得，此方法超越其他现有方法 *最可靠 只获取目标产物 应用范围： ●　基因组步移 - 启动子区域的克隆或者测序 - 基因结构(外显子/内含子结合区) - 已知序列上下游侧翼的扩增 - cDNA步移 - 裂隙填补(Gap Filling) - 序列标签位点(STSs)和表达序列标记(EST)的双向测序 ● 转基因位点检测 - 在转基因生物如转基因植物，动物，昆虫，鱼和细菌中发现转基因或T-DNA的位置或导向 - 直接扩增并分离出具有转基因或T-DNA的侧翼区域的DNA片断 ● 缺失/插入/突变体的检测 - 检测基因组DNA或cDNA的缺失，插入，或者突变体 - 剪切分析 ● 测序 - BAC / PAC DNA的末端测序或者步移 - BACs或者基因组DNA的直接测序 - 基因组DNA，cDNA或质粒DNA (BAC, PAC, YAC)的测序 - 无须亚克隆或者鸟枪克隆即可对BAC或PAC克隆测序 - 长链DNA的快速测序 - 基因组测序计划*基因组步移 -启动子区域的克隆或者测序 -基因结构(外显子/内含子结合区) -裂隙填补(Gap Filling) 客户列表 中国科学院上海生命科学研究院 中国科学院动物所 中国农业科学院 中国热带农业科学院 云南大学 云南农业大学 中国农业大学 浙江大学 南京农业大学 西南农业大学 ...... DNA WALKING REFERRENCE 1. Characterization of Mutations in AlHK1 Gene from Alternaria longipes: Implication of Limited Function of Two-Component Histidine Kinase on Conferring Dicarboximide Resistance. J. Microbiol. Biotechnol. (2008), 18(1), 15?2 2. Cloning and Expression Analysis of a Chitinase Gene Crchi1 from the Mycoparasitic Fungus Clonostachys rosea. The Journal of Microbiology, October 2007, p. 422-430 3. Cloning and phylogenetic analysis of the chitinase gene from the facultative pathogen Paecilomyces lilacinus. Journal of Applied Microbiology 103 (2007) 2476?488 4. Cloning of the gene Lecanicillium psalliotae chitinase Lpchi1 and identificat