RNA干扰在慢性疼痛治疗中的应用_百替生物.pdf

RNA干扰在慢性疼痛治疗中的应用 第二军医大学东方肝胆外科医院麻醉科 吴飞翔 综述 俞卫锋 审校 摘要 慢性疼痛的治疗临床上效果不佳，集中发展更多有效的治疗方法已经 成为一个普遍的主题。RNA干扰就是一种有潜力的新方法，通过siRNA的输 入可选择性降解疼痛相关蛋白的mRNA，从而解除疼痛。慢性疼痛通路中某些 兴奋性异常增高的位点因而成为siRNA的沉默目标。本综述将主要就siRNA 的干预靶位及其临床应用的难度进行阐述。 关键词 慢性疼痛 siRNA RNAi P2X 受体 3 简介 慢性疼痛不仅是医学界的一个难题，而且已成为社会经济的一大负担， 据统计，全世界有三亿二千多万人受到慢性疼痛的困扰。慢性疼痛大致分为 以下几种：术后疼痛、癌性疼痛、下腰痛、HIV痛、神经病理性疼痛、关节痛 和偏头痛。目前慢性疼痛的治疗效果不佳，特别是晚期癌痛和慢性顽固性疼 痛。静脉或口服阿片类药物是缓解疼痛的最佳方法，但又带来呼吸抑制、便 秘及成瘾等诸多副作用，病人自控镇痛技术的出现，给癌痛患者带来了福音， 但同样存在难以长期维持、增加感染机会、费用较高等问题。寻找更方便、 有效、且经济、安全的镇痛方法，成为人们关注的课题。最近，RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术在慢性疼痛模型研究中取得一定进展，表明它有望 成为一种具有潜力的疼痛治疗的新方法。 RNA干扰及其作用机制 service@100 service@100 wwwwww..110000bbiiootteecchh..ccoomm sseerrvviiccee@@110000bbiiootteecchh..ccoomm 所谓RNA干扰RNAi就是利用双链RNA(double strandedRNA, dsRNA)高效、 特异的阻断体内特定基因表达，促使mRNA 降解,使细胞表现出特定基因缺失 表型的过程，即诱导序列特异的转录后基因沉默(post-transcriptional [ 1 ] gene silencing, PTGS) 。 RNA干扰（RNAinterference,RNAi）是由双链RNA诱导的，其作用机制起 [ 2 ] 始阶段和效应阶段(initiation and effector steps) 。在起始阶段，外 源导入或者由转基因、病毒感染等各种方式引入的双链RNA 将被RNase Ⅲ家 族中的一个能够特异性识别双链RNA的酶Dicer，以ATP依赖的方式逐步切割为 [ 3 ] 21～23nt的小分子干扰RNA片段(smallinterferingRNAs,siRNA) 。siRNA 3’末端有2～3个游离末配对的核苷酸(dTdT或UU)。在效应阶段，siRNA双链 与核酶复合物结合形成RNA诱导沉默复合物(RNA - induced silencing complex,RISC)。RISC以ATP依赖性方式激活，RISC中siRNA变性，双链解开， 卸下正义链，反义链仍结合在复合物上，并引导RISC与同源的靶目标RNA结合， 在核酸内切酶的作用下，自距离siRNA3’端12个碱基的位置处将靶mRNA切断， [2] 从而阻断了基因表达 。siRNA还可以作为一种特殊的引物，在RNA依赖的RNA 聚合酶（RdRP）的作用下，以靶mRNA为模板合成dsRNA分子，后者又可被RISC 降解为新的siRNA，新生成的siRNA又进入上述循环，这一过程被称为随机降 [ 2 ] 解性聚合酶链反应( random degradative PCR) 。新生的dsRNA反复合成与 降解，不断形成新的siRNA，从而