421 红外分光光度法检查标准操作规程.doc

SOP-QM-421-00 执行日期： 年 月 日 题目 红外分光光度法检查标准操作规程 起草： 年 月 日 部门审核： 年 月 日 质量部审查： 年 月 日 批准： 年 月 日 发放部门 质量部 目的：规范红外分光光度法检查操作法 范围：原辅料 职责：检验室对本规程的实施负责 正文： 1.原理 ——化合物受红外辐射照射后，使分子的振动和转动运动由较低能级向较高级跃迁，从而导致对特定频率红外辐射的选择吸收，形成特征性很强的红外吸收光谱，红外光谱又称振-转光谱。 ——红外光谱是鉴别物质和分析物质化学结构的有效手段，已被广泛应用于物质的定性鉴别、物相分析和定量测定，并用于研究分子间和分子内部的相互作用。 ——红外区分为3个区域，即近红外区（12800～4000cm-1，0.78～2.5μm），中红外区（4000～400cm-1，2.5～25μm），和远红外区（400～10cm-1，25～1000μm）。红外吸收与物质浓度的关系在定范围内服从于朗伯—比尔定律，因而它也是红外分光光度法定量的基础。 2.红外分光光度计的检定 2.1波数准确度检定方法 2.1.1波数准确度的允差范围，在4000～2000cm-1间允许误差为±8cm-1,在2000至400cm-1，允许误差为±4cm-1。 2.1.2波数准确度检定方法 2.1.2.1以聚苯乙烯膜校正 按仪器使用说明书要求设置参数，以常用的扫描速度记录厚度为50μm的聚苯乙烯膜红外光谱图。测量有关谱带的位置，其吸收光谱图应符合《药品红外光谱集》所附聚苯乙烯图的要求，并与参考波数（见表1）比较，计算波数准确度。 表1 聚苯乙烯吸收光谱常用的波数值 波数(cm-1) 波数（cm-1） 2850.7 1154.3 1944.0 1028.0 1801.6 906.7 1601.4 2.1.2.2以液体池用液体茚校正 液体茚在3900～690cm-1范围内有较多的吸收峰，可见比较适于测定中等分辨率的仪器。一般需用适当液层厚度的固定厚度密封液体池，选用液体池的窗片料应能保证在测量波数范围内有良好的红外光透过率 、窗片应有良好的光洁度和平面平行度 、注样品时将液体池放在一楔形板上，打开2个进样孔塞，把样品用专用注射器从下部进样孔缓缓注入同时观察内液面缓缓上升而不夹带气泡，至液体在上进样孔内接近满溢时，取下注射器先盖好下进样孔塞，再盖上上进样孔塞，吸去外溢液体后即可在仪器上测定吸收光 谱，其主要谱带见表2。 表2 茚主要吸收谱带的波数值（50μm液层，cm-1） 3970 3139.5 2770.3 1915.3 1553.2 1361.1 1251 1018.5 590.8 381.4 2.2波数重现性 用与2.1波数准确度测量相同的仪器参数，对同一张聚苯乙烯膜进行反覆重叠扫描，一般扫描3～5次。从扫描所得光谱测定波数的重现性。测得的各吸收峰的重现性应符合国家计量检定规程的要求。 2.3分辨率 以聚苯乙烯膜检定，用常规狭缝程序，通常的扫描速度，或以较狭的狭缝程序，用较慢的扫描速度，记录聚苯乙烯的图谱。在3110～2850cm-1范围内，应能显示7个吸收带，其中2924cm-1和2851cm-1两谱带的分辨深度应不小于18﹪透光率； 1601cm-1与1583cm-1吸收带的分辨深度应不小于12﹪透光率。 2.4100%线平直度 调节100%控制旋钮，使记录笔置于95%透光率处，以快速扫描速度扫描全波段，其100﹪线的偏差应小于4﹪透光率。 2.5噪声 调节100﹪控制旋转钮，使记录笔置于95﹪透光率处，在1000 cm-1处定波数连续扫描5分钟，其最大噪声（峰-峰值）应小于1﹪透光率。 2.6其它 杂散光水平和透光率准确度检查，因需要特殊器件，且对药品测定影响不大，故不作硬性要求。详见JJG681-90检定规程。 3.红外光谱测定操作方法 红外光谱测定技术分两类。一类是指检测方法，如透射、衰减全反射、漫反射、光声及红外光发射等；另一类是指制样技术。在药物分析中，通常测定的