毕赤酵母表达风味强化肽的分离与纯化.pdf

第 26卷 第 4期 天津科技大学学报 Vo1．26 NO 4 2011年 8月 JournalofTianjinUniversityofScienceTechnology Aug．201l 毕赤酵母表达风味强化肽的分离与纯化 田 雪，张宝持，白小佳 ，王艳萍 (食品营养与安全教育部重点实验室 ，天津科技大学食品 程 与生物技术学院，天津 300457) 摘 要：为了开发新型风味强化剂，采用硫酸铵分段盐析法、中空纤维超滤、阴离子交换树脂分离等方法，对构建的 工程菌 postorisGS1l5—16B2发酵表达的 16拷贝风味强化肽的分离纯化效果进行研究．实验结果表明，分离纯化最 佳方法为：首先使用中空纤维进行超滤浓缩，经过两次稀释过滤浓缩后的浓缩液再采用离子交换树脂 DEAE一52进一 步分离纯化．经 SDS—PAGE检测 ，纯化后 16拷 贝风味强化肽 的平均纯度可达 93．19％． 关键词：毕赤酵母；风味强化肽；盐析；中空纤维超滤；离子交换树脂；分离纯化 中图分类号：Q503 文献标志码：A 文章编号：1672—6510(20l1)04一J【(】14—04 SeparationandPurificationofFlavorEnhancingPeptide from PichiaPcs‘toris TIANXue，ZHANGBao—chi，BAIXiao-jia，WANGYan—ping (KeyLaboratoryofFoodNutritionandSafety，MinistryofEducation，CollegeofFoodEngineeringandBiotechnology TianjinUniversityofScienceTechnology，Tianjin300457，China) Abstract：Theseparationandpurificationmethodof16copiesflavorenhancingpeptidefrom PichiaPastot’isfermentation brothwasstudiedbyfractionalsaltingout，hollow fiberultrafiltrationandanionexchangeresin．Theresultsshowedthebest separationandpurificationmethod．Thebrothwasfirstultrafiltrationenrichedtwicebyhollow fibercolumn，andthenfur— therpurifiedbyion—exchangeresinDEAE一52．Afterthepurification，theaveragepurityof16copiesflavorenhancingpeptide was93．19％ detectedbySDS—PAGE． Keywords：Pichiapastoris；flavorenhancingpeptide；salting—out；hollow fiberultrafiltration；ion exchange resin； separationandpurification 风味强化肽最初是从牛肉的木瓜蛋 自酶水解物 进行诱导表达I41．本文在前期 l作的基础 ，刈构 建 中分离得到的一种八肽 ，它与食盐、味精有较好的协 的T程菌P．postorisGS115—16B2发酵表达的 16拷 同呈味作用，并且具有很好的热稳定性，适合于食品 贝风味强化肽 的分离纯化方法作 了探索性尝试，授J分『 1业生产中的热处理要求．因此，风味强化肽有望代 别运用硫酸铵分段盐析